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武漢紐斯特生物科技有限公司(WuhanNewEastBiotechonologyCo.Ltd),系美國(guó)生命科學(xué)試劑供應(yīng)商美國(guó)NewEastBio在中國(guó)的子公司。公司位于武漢東湖高新技術(shù)開(kāi)發(fā)區(qū)光谷生物城.美國(guó)NewEastBio專(zhuān)注于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域,主要產(chǎn)品有小分子、ELISA試劑盒、蛋白等,與世界高校和研究所、世界大制藥公司、生物科技公司和醫(yī)院等客戶(hù)建立了長(zhǎng)期穩(wěn)定的合作關(guān)系,產(chǎn)品銷(xiāo)往世界。
注意步驟
在使用前,將所有試劑放置30分鐘,平衡至室溫。
用試劑預(yù)先潤(rùn)洗頭在使用;取各種樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和試劑必需更換頭。
移取標(biāo)準(zhǔn)品和樣品到微孔底部。
從微孔的邊緣加入試劑,以避免污染。
該試劑盒使用可拆分的微孔酶標(biāo)條,使用者可根據(jù)樣品量多少進(jìn)行拆分。未使用的酶標(biāo)條保持干燥,密封于試劑盒提供的鋁封袋中,于4℃保存。微孔酶標(biāo)條需安裝在相應(yīng)的框架上使用。
在加入顯色底物前,確保微孔內(nèi)沒(méi)有殘留的洗滌液。微量殘留的洗滌液可能導(dǎo)致分析結(jié)果的變化。
紐斯特生物的ELISA試劑盒適用于檢測(cè)經(jīng)過(guò)鹽酸處理而終止內(nèi)源性磷酸二酯酶活性的cAMP樣品。這種樣品可直接應(yīng)用于檢測(cè),而不需要蒸發(fā)和進(jìn)一步的處理。
組織樣本需預(yù)先冰凍于液氮中。在不銹鋼研缽中用液氮將組子樣本研磨成精細(xì)粉末。待液氮揮發(fā)完后,稱(chēng)量冰凍組織樣本并加入10倍體積的0.1M HCl混勻。室溫以大于600g離心力離心,取上層清夜用0.1M HCl稀釋至適當(dāng)濃度。
武漢紐斯特生物科技有限公司(WuhanNewEastBiotechonologyCo.Ltd),系美國(guó)生命科學(xué)試劑供應(yīng)商美國(guó)NewEastBio在中國(guó)的子公司。公司位于武漢東湖高新技術(shù)開(kāi)發(fā)區(qū)光谷生物城.美國(guó)NewEastBio專(zhuān)注于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域,cAMP antibody,主要產(chǎn)品有小分子、ELISA試劑盒、蛋白等,與世界高校和研究所、世界大制藥公司、生物科技公司和醫(yī)院等客戶(hù)建立了長(zhǎng)期穩(wěn)定的合作關(guān)系,產(chǎn)品銷(xiāo)往。
體外用GTPγS/GDP處理蛋白以用作陽(yáng)性和陰性的對(duì)照
注意:在細(xì)胞體內(nèi)環(huán)境條件下大約有10%的Ras被激l活,而在體外用GTPγS處理大約有90%的Ras被激l活。
1.
準(zhǔn)備兩個(gè)離心管,每個(gè)管中各加入0.5 mL的細(xì)胞提取物(如果是純的Ras蛋白則每個(gè)管中加入的蛋白量為1ug)。
2.
每個(gè)管中加入20ul 0.5M EDTA(終濃度即為20 mM)。
3.
一個(gè)管中加入5ul的100X GTPγS(終濃度即為100 uM)作為陽(yáng)性對(duì)照。另一個(gè)管中加入5ul的100X GDP(終濃度即為1 mM)作為陰性對(duì)照。
4.
將離心管置于30°C條件下反應(yīng)30 min并不斷攪動(dòng)。
5.
終止反應(yīng):將管置于冰上并加入32.5ul 1M MgCl2(終濃度即為60mM)。
企業(yè): 武漢紐斯特生物技術(shù)有限公司
手機(jī): 15002729010
電話: 027-87561033
地址: 湖北省武漢市東湖新技術(shù)開(kāi)發(fā)區(qū)高新大道666號(hào)光谷生物城B3-3棟3樓