無芽孢：E=209—250*103J/mol。顯然，（5）式的比值〉1，說明提高溫度對于第二個平行反應(yīng)，即菌體死亡的反應(yīng)是有利的。提高溫度，雖然兩個平行性反應(yīng)的反應(yīng)速度常數(shù)都提高了，但是，達(dá)到同樣的**效果，所需要的時間卻縮短了，由于***個反應(yīng)也就是營養(yǎng)成分破壞的反應(yīng)速度常速增加的少，因此，有利于減少培養(yǎng)基在**過程中營養(yǎng)成分的破壞。換言之，高溫短時**對于培養(yǎng)基營養(yǎng)成分是有利的。通常所說的高溫短時**可以提高生產(chǎn)效益，其理論根據(jù)就在于此。結(jié)論1：當(dāng)**溫度上升時，微生物殺死速率的提高要超過培養(yǎng)基成分的破壞速率的增加。要減少營養(yǎng)成分的破壞，可升高溫度**。結(jié)論2：在**時選擇較高的溫度、較短的時間，這樣便既可達(dá)到需要的**程度，同時又可減少營養(yǎng)物質(zhì)的損失。（二）、影響**效果的因素（1）微生物種類：不同的微生物k值不同。（2）初始菌量：在保持N值不變的前提下，t與初始菌量N0的對數(shù)成正比。（3）培養(yǎng)基成份：油脂、蛋白質(zhì)增加微生物的耐熱性。(4)傳熱與混合狀況：影響受熱均勻度。(5)培養(yǎng)基中固體顆粒的存在影響熱穿透。(6)蒸汽中空氣的存在降低蒸汽分壓和**溫度。(7)pH：酸性pH下可加快微生物熱死速率三、培養(yǎng)基的工業(yè)**。F12培養(yǎng)基適用于多種類型的細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)。廣東DMEM高糖培養(yǎng)基進(jìn)口

    微量元素在細(xì)胞內(nèi)通常以與有機(jī)物結(jié)合的形式存在。其中鐵在細(xì)胞中參與氧的轉(zhuǎn)運(yùn)；鈷是維生素B12的組成部分，參與葉酸的合成和脂肪酸的合成；鎳能夠***脫氧核糖核酸酶、乙酰輔酶A合成酶等在細(xì)胞內(nèi)具有重要功能的酶，還具有穩(wěn)定核酸結(jié)構(gòu)的功能；亞硒酸鈉中的硒，作為谷胱甘肽過氧化物酶的輔基，具有抗過氧化物能力，參與消除細(xì)胞內(nèi)的脂肪酸過氧化物，提高細(xì)胞的生長速率和活性。在低血清、無血清細(xì)胞培養(yǎng)基中，為滿足細(xì)胞生長增殖需要，常常添加一些成份：蛋白質(zhì)、多肽、核苷、嘌呤、檸檬酸循環(huán)的中間產(chǎn)物、脂類、及一些血清替代因子等。其中蛋白質(zhì)具有重要的作用，動物細(xì)胞對許多物質(zhì)（難溶于水的離子或脂類物質(zhì)）的攝取需要借助蛋白質(zhì)的傳遞作用，如白蛋白、傳遞蛋白、貼壁蛋白等能夠攜帶脂肪酸、***、礦物質(zhì)等促進(jìn)細(xì)胞生長。轉(zhuǎn)鐵蛋白是一種重要的傳遞蛋白，能夠結(jié)合鐵，促進(jìn)細(xì)胞對鐵離子的吸收，并具有***作用，其促生長作用可能與其具有生長因子的功能有關(guān)。胰島素可促進(jìn)細(xì)胞對葡萄糖和氨基酸的利用，商業(yè)化中一些生長因子以重組蛋白形式添加到培養(yǎng)基中，主要用來刺激細(xì)胞增殖，并可促進(jìn)糖元和脂肪酸的合成。乙醇胺是一種重要的刺激細(xì)胞生長的化合物，是腦磷酸的合成前提。廣東DMEM高糖培養(yǎng)基進(jìn)口無血清培養(yǎng)基為細(xì)胞培養(yǎng)提供了更清晰的背景。

    這里介紹熱力消毒**法。高熱破壞微生物蛋白質(zhì)、核酸、細(xì)胞壁和細(xì)胞膜，從而導(dǎo)致微生物死亡。受高熱作用后，蛋白質(zhì)分子運(yùn)動加快，肽鏈連接鍵斷裂，蛋白變性凝固；細(xì)胞膜功能受損使胞內(nèi)物質(zhì)漏出，**內(nèi)外環(huán)境平衡失調(diào)。不同種類微生物對熱的耐受力不同，多數(shù)無芽胞**經(jīng)55-60℃作用30-60分鐘后死亡，100℃時迅速死亡。有芽胞**則對高溫有強(qiáng)的抵抗力，如肉毒芽胞梭菌煮沸需3—5小時才死亡。熱力**分干熱**法和濕熱**法兩大類，相同溫度下后者較前告效力大，其原因是：①濕熱環(huán)境中菌體蛋白易凝固；②濕熱穿透力比干熱大；③濕熱蒸氣變?yōu)橐簯B(tài)時可釋放潛熱，迅速提高被**物體的溫度。1．干熱（dryheat）**法(1)焚燒。直接點(diǎn)燃或在焚燒爐內(nèi)進(jìn)行，*適用于廢棄物品或動物尸體。(2)燒灼。直接以火焰**，適用于微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室接種環(huán)、針和試管口等**。(3)干烤。在干烤箱內(nèi)進(jìn)行，加熱至150-180℃2-4小時達(dá)到**效果，適用于高溫下不變質(zhì)、不被破壞和不蒸發(fā)的物品，如玻璃器皿、瓷器，不能用于塑料、棉、紙制品。2．濕熱(moistheat)消毒**法(1)巴氏消毒法。巴氏消毒法(pasteurization)是用較低溫度殺滅液體中的病原微生物或特定微生物而保持物品中所需的不耐熱成分的方法。

    導(dǎo)致細(xì)胞培養(yǎng)基變質(zhì)失效。控制細(xì)胞培養(yǎng)基中**和霉菌，是延長細(xì)胞培養(yǎng)基有效期的方法之一。清大天一在參考《中華******典》2005版二部附錄第100頁的口服給*制劑的微生物限度標(biāo)準(zhǔn)，并嚴(yán)于該標(biāo)準(zhǔn)，規(guī)定細(xì)胞培養(yǎng)基產(chǎn)品的**數(shù)每1g不得超過200個，霉菌數(shù)每1g不得超過50個。稱取樣品1g，加入無菌純化水10mL溶解，混勻即得試樣。按中華******典2005年版二部附錄ⅪJ微生物限度檢查法進(jìn)行，檢查項(xiàng)目為**數(shù)、霉菌數(shù)。檢查法采用平皿法。細(xì)胞生長試驗(yàn)這是一個性能特性表述的要求。細(xì)胞培養(yǎng)基的功能就是培養(yǎng)哺乳類動物細(xì)胞，因此經(jīng)過細(xì)胞培養(yǎng)效果的檢驗(yàn)是產(chǎn)品***劣的直觀表述，這也是很多生物制*用戶要求的一項(xiàng)指標(biāo)。目前國內(nèi)尚無細(xì)胞培養(yǎng)和計(jì)數(shù)的法定方法，可參考《體外培養(yǎng)的原理與技術(shù)》中細(xì)胞計(jì)數(shù)法論述的內(nèi)容給出。按產(chǎn)品說明書配制培養(yǎng)液進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，前四天用含10％小牛血清的培養(yǎng)液培養(yǎng)，觀察細(xì)胞形態(tài)并計(jì)數(shù)，檢查細(xì)胞培養(yǎng)基是否有促生長的能力。后三天用不含小牛血清的培養(yǎng)液維持培養(yǎng)，觀察細(xì)胞形態(tài)并計(jì)數(shù)，檢查細(xì)胞培養(yǎng)基中是否有不利細(xì)胞生長的***。本試驗(yàn)用細(xì)胞為VERO細(xì)胞。四、細(xì)胞培養(yǎng)基的使用方法細(xì)胞培養(yǎng)基的種類繁多，細(xì)胞培養(yǎng)方式也較多。MEM培養(yǎng)基適用于多種哺乳動物細(xì)胞的體外培養(yǎng)和實(shí)驗(yàn)研究。

    已發(fā)現(xiàn)當(dāng)培養(yǎng)基中的血清濃度減少時，這些成分都是必需的。既使在使用血清的情況下，這些成分也可幫助細(xì)胞的克隆化培養(yǎng)及維持某些特殊細(xì)胞系的生長。***和生長因子在大多數(shù)常規(guī)培養(yǎng)基的配方中都沒有注明，但在無血清培養(yǎng)基中通常要加入它們，用其來代替血清中的***能增加多種不同類型細(xì)胞的貼瓶率；生長因子包括FGF家族、EGF、PDGF、IGF－1和IGF－2及白介素等，生長因子和細(xì)胞因子有著***的特異性，一般與***或其它物質(zhì)起相互協(xié)同或加成作用。另一種常見的添加物就是血清替代物，目前已有許多可完全或部分替代傳統(tǒng)培養(yǎng)液中血清成分的商業(yè)產(chǎn)品，其穩(wěn)定性較好，但批次間仍有差別，產(chǎn)品的成分也不很確定。干粉培養(yǎng)基原倍液的配制1）配制過濾**的細(xì)胞培養(yǎng)基(1)閱讀培養(yǎng)基使用說明，確定需要添加何種添加劑（如NaHCO3、L-谷氨酰胺、**酸鈉、HEPES等）。(2)根據(jù)所需將培養(yǎng)基全部倒入一容器中，用少量注射用水（20℃～30℃）將袋內(nèi)殘留培養(yǎng)基洗下，并入容器。加注射用水至總體積的95％，輕微攪拌溶解。(3)加入規(guī)定量的碳酸氫鈉及所要添加的物質(zhì)。(4)輕微攪拌溶解，加注射用水至規(guī)定體積。(5)用1mol/L氫氧化鈉溶液或1mol/L鹽酸溶液調(diào)pH至所需值。(6)用μm濾膜正壓過濾**。。減血清培養(yǎng)基提高了細(xì)胞培養(yǎng)的重復(fù)性和可靠性。廣東DMEM高糖培養(yǎng)基進(jìn)口

MEM培養(yǎng)基提供了豐富的營養(yǎng)成分，支持細(xì)胞的快速增殖。廣東DMEM高糖培養(yǎng)基進(jìn)口

    nh4)2so4264mg、nh4h2po4288mg、mgso4·7h2o370mg、cacl2332mg、mnso4·h2o15mg、znso4·7h2o4mg、h3bo33mg、cocl2·、cuso4·、na2moo4·、nafeedta37mg、肌醇100mg、煙酸2mg、鹽酸硫胺素7mg、鹽酸吡哆醇1mg、甘氨酸2mg。將本實(shí)施例中的廣適性植物**培養(yǎng)基命名為cs基本培養(yǎng)基。實(shí)施例二，本實(shí)施例廣適性植物**1/2培養(yǎng)基，其每1000ml培養(yǎng)基中含有：kno31331mg、(nh4)2so4132mg、nh4h2po4144mg、mgso4·7h2o185mg、cacl2166mg、mnso4·h2o15mg、znso4·7h2o4mg、h3bo33mg、cocl2·、cuso4·、na2moo4·、nafeedta37mg、肌醇100mg、煙酸2mg、鹽酸硫胺素7mg、鹽酸吡哆醇1mg、甘氨酸2mg。將本實(shí)施例中的廣適性植物**1/2培養(yǎng)基命名為1/2cs基本培養(yǎng)基。上述實(shí)施例中的cs基本培養(yǎng)基、1/2cs基本培養(yǎng)基與現(xiàn)有ms基本培養(yǎng)基及1/2ms基本培養(yǎng)基的成分對比如表1所示：表1ms、cs、1/2ms、1/2cs基本培養(yǎng)基成分表上述實(shí)施例中的cs基本培養(yǎng)基和1/2cs基本培養(yǎng)基，若應(yīng)用于植物**培養(yǎng)中的固體培養(yǎng)基制作，可根據(jù)實(shí)際需要添加包含但不限于適量***、蔗糖、葡萄糖、白糖、瓊脂、植物凝膠、卡拉膠、大量元素水溶肥等，添加量同ms培養(yǎng)基一致，調(diào)節(jié)ph至，121℃15min滅菌后搖勻分裝。廣東DMEM高糖培養(yǎng)基進(jìn)口