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留點溫度計標化合格后方可用于驗證試驗。檢測前,需將溫度計的**柱甩至40℃以下。每次監(jiān)測后留點溫度計的溫差應存l℃之間,則說明**器內的溫度分布是均勻的。**后的菌片應在嚴格無菌操作條件下放入**后的溴甲酚紫胨水培養(yǎng)基內56-60℃培養(yǎng)24-48小時,觀察顏色變化。如培養(yǎng)基變?yōu)辄S色,說明菌片中的嗜熱脂肪芽胞桿菌尚未完全滅活,**仍可在培養(yǎng)基中生長,分解葡萄糖產(chǎn)酸變?yōu)辄S色。如培養(yǎng)基顏色不變化仍為紫色,則說明芽胞已滅活。同時要用未經(jīng)**的紙片放入培養(yǎng)基內作為陽性對照,不加紙片的空白培養(yǎng)基作為陰性對照?;瘜W指示卡上的指示色塊,在高壓蒸氣**時,由淡黃色變?yōu)楹谏?。隨著顏色變化的深淺,并與對照色相比,可判斷**效果是否達到要求?;瘜W指示卡應在干燥處保存。遇潮會變色,影響**效果的觀測。高壓蒸氣**必須使蒸氣順利進入**器內,與**物品接觸,并將原有的冷空氣排出方可達到**的效果。要進行空載熱分布和滿載熱穿透力驗證(滿載時不超過總體積的2/3)。二種驗證各重復三次,共做六次。5個點六次試驗表明溫度均在121℃,化學指示卡變黑;程度與對照色一致;培養(yǎng)基均未改變顏色,說明高壓蒸氣**效果合格。高壓**器屬于強檢儀器,但強檢只是對儀器物理參數(shù)的考核。RPMI1640培養(yǎng)基在免疫細胞培養(yǎng)中表現(xiàn)出色。河北F12培養(yǎng)基哪個好
另外,酚紅作為pH值的指示劑被加入到細胞培養(yǎng)基中。酚紅在產(chǎn)物純化過程中會造成干擾,并且具有一定的固醇類***樣作用,如雌***樣作用。當用于哺乳類動物細胞的培養(yǎng),可能會發(fā)生一些固醇類反應。現(xiàn)在商業(yè)化細胞培養(yǎng)基中的酚紅含量可根據(jù)需求調整。因生物反應器具有pH在線檢測技術,生物反應器培養(yǎng)動物細胞時,酚紅可完全去除。細胞保護劑是保護細胞免受滲透壓變化、剪切力、氧化及氣泡作用等引起的損傷的物質。在使用生物反應器培養(yǎng)動物細胞時,細胞易被機械攪拌和通氣鼓泡產(chǎn)生的流體剪切力和氣泡作用所傷害甚至破損死亡。為降低這種損傷,除優(yōu)化生物反應器結構和生產(chǎn)工藝外,可在細胞培養(yǎng)液中添加一些保護劑。其主要是通過改變細胞培養(yǎng)基物性或是對細胞具有保護作用的物質,常用的種類有血清、白蛋白、聚已二醇(PEG)、非離子性表面活性劑PluronicF68或是其他一些高分子聚合物等。3.細胞培養(yǎng)基的理化性質動物細胞在細胞培養(yǎng)基中不僅能存活,還要分裂增殖,合適的滲透壓、pH值等理化性質是細胞培養(yǎng)基必須具備的前提條件。動物細胞大多數(shù)需要輕微的堿性條件,適宜pH在~。細胞培養(yǎng)基的pH值通常需經(jīng)校正的pH計來測定。在細胞生長過程中,隨細胞數(shù)量的增多和代謝活動的加強。河北F12培養(yǎng)基哪個好無血清培養(yǎng)基為細胞培養(yǎng)提供了更清晰的背景。
4、本發(fā)明植物**培養(yǎng)基,其不含碘化鉀,在絕大多數(shù)植物中,碘元素不是必需元素,實驗發(fā)現(xiàn)去除碘化鉀對植物**培養(yǎng)沒有影響,并且植物在脫離培養(yǎng)基進行后期培養(yǎng)時仍可以從土壤等基質中富集碘元素,去掉碘化鉀成分,也簡化了培養(yǎng)基配制過程。5、本發(fā)明植物**培養(yǎng)基,其用nafeedta取代na2·edta和feso4·7h2o,該替換減少的**根離子通過適當增加**銨成分來補充,該替換主要基于兩個特征,一方面,nafeedta是可溶性螯合鐵,更容易被植物吸收,有利于植物葉綠體發(fā)育,另一方面,發(fā)明人發(fā)現(xiàn),na2·edta和feso4·7h2o水溶液ph偏酸是ms、b5和n6等眾多植物**培養(yǎng)基原始ph偏低及ph波動大的主要原因,本發(fā)明培養(yǎng)基中使用nafeedta之后,經(jīng)ph為,而植物**適宜生長的ph一般為,因此,使用nafeedta既促進了植物對鐵離子的吸收,又有利于培養(yǎng)基ph的穩(wěn)定。6、本發(fā)明植物**培養(yǎng)基,其配方降低了mnso4·h2o、znso4·7h2o、h3bo3、cocl2·6h2o、na2moo4·2h2o的用量,增加了cuso4·5h2o、煙酸、鹽酸硫胺素、鹽酸吡哆醇的用量,該改變特征在于,有效減少愈傷**玻璃化發(fā)生,減少酚類物質產(chǎn)生,提高愈傷**的出愈率,實驗發(fā)現(xiàn),優(yōu)化后的培養(yǎng)基出愈時間提前,對多種植物的愈傷**誘導是有益的。
c、結果為:在用未調ph液體培養(yǎng)基進行培養(yǎng)時,整體長勢從優(yōu)至弱分別為1/2cs未調ph液體培養(yǎng)基、cs未調ph液體培養(yǎng)基、1/2ms未調ph液體培養(yǎng)基、ms未調ph液體培養(yǎng)基;在用ph調至,整體長勢從優(yōu)至弱分別為1/、、1/、;不論是否調ph至,cs液體培養(yǎng)基培養(yǎng)的馬鈴薯幼苗長勢均優(yōu)于ms液體培養(yǎng)基;不論是否調ph至,1/2cs液體培養(yǎng)基培養(yǎng)的馬鈴薯幼苗長勢均優(yōu)于1/2ms液體培養(yǎng)基。如圖9和圖10所示。說明,1/2cs液體培養(yǎng)基和cs液體培養(yǎng)基應用于植物水培時,不論是否調節(jié)ph至,均能獲得很好的培養(yǎng)效果,克服了傳統(tǒng)液體培養(yǎng)基必須調節(jié)ph后才適用于植物水培的缺點。**后說明的是,以上實施例*用以說明本發(fā)明的技術方案而非限制,盡管參照較佳實施例對本發(fā)明進行了詳細說明,本領域的普通技術人員應當理解,可以對本發(fā)明的技術方案進行修改或者等同替換,而其不脫離本發(fā)明技術方案的宗旨和范圍,則均應涵蓋在本發(fā)明的權利要求范圍當中。MEM培養(yǎng)基在細胞培養(yǎng)中表現(xiàn)出高效的穩(wěn)定性。
由于培養(yǎng)基的間歇**不需要專門的**設備,投資少,對設備要求簡單,對蒸汽的要求也比較低,且**效果可靠,因此,間歇**是中小型生產(chǎn)工廠經(jīng)常采用的一種培養(yǎng)基**方法。(三)、培養(yǎng)基的連續(xù)**1、定義:連續(xù)**也叫連消,將配制好的并經(jīng)預熱(60~75℃)的培養(yǎng)基用泵連續(xù)輸入由直接蒸汽加熱的加熱塔,使在短時間內達到**溫度(126~132℃)。然后進入維持罐(或維持管),使在**溫度下維持3~7分鐘后再進入冷卻管,使其冷卻至接種溫度并直接進入已事先**(空罐**)過的發(fā)酵罐內。其溫度一般以126~132℃為宜,總蒸汽壓力要求達到~MPa以上。培養(yǎng)基采用連續(xù)**時,需在培養(yǎng)基進入發(fā)酵罐前,直接用蒸汽進行空罐**(空消),用無菌空氣保壓,待培養(yǎng)基流入罐后,開始冷卻。**時對培養(yǎng)基的加熱可采用各種加熱器。培養(yǎng)基的冷卻方式有噴淋冷卻式、真空冷卻式、薄板換熱器式幾種方式,其過程均包括加熱、維持和冷卻階段。2、連續(xù)**的流程:(1)由熱交換器組成的**系統(tǒng)流程中采用了薄板換熱器作為培養(yǎng)液的加熱和冷卻器,蒸汽在薄板換熱器的加熱段使培養(yǎng)液的溫度升高,經(jīng)維持段保溫一定時間后,培養(yǎng)基在薄板換熱器的冷卻段進行冷卻。F12培養(yǎng)基適用于復雜細胞培養(yǎng)實驗。河北F12培養(yǎng)基哪個好
無血清培養(yǎng)基確保了細胞的純凈生長。河北F12培養(yǎng)基哪個好
3)擬南芥葉片愈傷**的誘導方法:用手術剪刀剪開長勢良好的無菌葉片,用鑷子將其取出擺放在步驟(1)的誘導培養(yǎng)基中,使傷口接觸培養(yǎng)基;于溫度23-25℃、濕度50-70%、光照強度1500-2500lux、光照和黑暗交替(光照時間16h、黑暗時間8h)條件下培養(yǎng)。(4)擬南芥根愈傷**的誘導方法:用鑷子取出無菌苗的根,用手術剪刀剪開后平鋪于步驟(2)的誘導培養(yǎng)基中,培養(yǎng)條件同步驟(3)。(5)cs誘導培養(yǎng)基的誘導結果為:擬南芥葉片愈傷**誘導時,培養(yǎng)6-8d在切口處出現(xiàn)顆粒狀愈傷**,培養(yǎng)24-26d獲得嫩綠色致密的團塊狀愈傷**,顆粒狀愈傷**誘導率及愈傷**總誘導率均為100%;擬南芥根愈傷**誘導時,培養(yǎng)5-7d在切口處開始出現(xiàn)少量顆粒狀愈傷**,培養(yǎng)20-22d獲得較大體積的淡黃色松脆型愈傷**,且在愈傷**周圍觀察到大量致密分布的白毛,顆粒狀愈傷**誘導率及愈傷**總誘導率均為100%。如圖5所示。對比培養(yǎng)例5:將cs基本培養(yǎng)基替換為ms基本培養(yǎng)基,其余完全同培養(yǎng)實例5,ms基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示。ms誘導培養(yǎng)基的誘導結果為:擬南芥葉片愈傷**誘導時,培養(yǎng)7-10d在切口處出現(xiàn)顆粒狀愈傷**,培養(yǎng)24-26d獲得嫩綠色致密的團塊狀愈傷**,顆粒狀愈傷**誘導率及愈傷**總誘導率均為100%。河北F12培養(yǎng)基哪個好
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