ELISA操作步驟復雜，影響反應因素較多。

測定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA，標準曲線的范圍一般較寬，曲線ZUI高點的吸光度可接近2.0，繪制時常用半對數(shù)值，以檢測物的濃度為橫坐標，以吸光度為縱坐標，CAMP/CGMP 代檢測，將各濃度的值逐點連接，所得曲線一般呈S形，其頭、尾部曲線趨于平坦，中央較呈直線的部分是ZUI理想的檢測區(qū)域。

ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。

免疫測定技術的基礎在于抗原抗體之間的特異結(jié)合反應。以前用于免疫測定的抗原通常為各種純化抗原，而抗體則為純化抗原免疫動物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術得到的單克隆抗體，而抗原或抗體的標記物如酶標結(jié)合物則通過各種化學合成方法制備。

影響Elisa試驗結(jié)果的因素很多，故加強各個環(huán)節(jié)的質(zhì)量的保證才能充分發(fā)揮其方法學的優(yōu)點。

ELISA（酶聯(lián)免疫吸附劑測定）一般指酶聯(lián)免疫吸附劑測定酶聯(lián)免疫吸附測定（enzyme linked immunosorbent assay，簡寫ELISA或ELASA）指將可溶性的抗原或抗體結(jié)合到polystyrene等固相載體上，利用抗原抗體特異性結(jié)合進行免疫反應的定性和定量檢測方法。酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）為免疫學中的經(jīng)典實驗，本詞條從定義、基本原理、分類方法、操作要點等方面對其進行了詳細介紹。

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