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自噬流檢測(cè)
自噬是調(diào)節(jié)真核細(xì)鵬生長(zhǎng)、和能量代謝的重要生物學(xué)機(jī)制。細(xì)胞自噬行使其生物學(xué)功能的前提是自噬流的話化。大量證據(jù)表明自噬流受損與多種慢性炎性疾病,特別是、神經(jīng)退行性疾病及組織纖維化的發(fā)病密切相關(guān),目前對(duì)于自噬液的檢別是自噬與其相關(guān)疾病研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)。由于自噬流是一個(gè)曲多個(gè)步驟組成的動(dòng)態(tài)過程。因此往需要精細(xì)的突驗(yàn)才能準(zhǔn)確判斷自啦流狀態(tài)。
細(xì)胞培養(yǎng)中常見的污染及解決方法
黑點(diǎn)污染
黑色的游動(dòng)點(diǎn)能穿透濾膜并在空氣中擴(kuò)散。它們?cè)诘捅剁R下顯示為黑色圓點(diǎn),上海細(xì)胞,在高倍鏡下顯示為可移動(dòng)的黑點(diǎn)。培養(yǎng)液也不渾濁,一般影響較小,因此細(xì)胞仍可使用。通常,單細(xì)胞測(cè)序技術(shù),黑點(diǎn)污染后,細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn),細(xì)胞生長(zhǎng)良好,運(yùn)動(dòng)物體無明顯增加,感受態(tài)細(xì)胞,培養(yǎng)基的顏色和透明度無明顯變化。在同一批培養(yǎng)的細(xì)胞中也可以發(fā)現(xiàn)類似的現(xiàn)象。
解決方法:黑點(diǎn)對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)沒有明顯影響,細(xì)胞增殖后會(huì)自然消失,因此除了置換外,無需特殊處理。如果細(xì)胞可能被小的運(yùn)動(dòng)點(diǎn)污染,建議增加培養(yǎng)皿細(xì)胞密度,以提高細(xì)胞存活率。
細(xì)胞分化
細(xì)胞分化是指同一來源的細(xì)胞逐漸產(chǎn)生出形態(tài)結(jié)構(gòu)、功能特征各不相同的細(xì)胞類群的過程,其結(jié)果是在空間上細(xì)胞產(chǎn)生差異,在時(shí)間上同一細(xì)胞與其從前的狀態(tài)有所不同。細(xì)胞分化的本質(zhì)是基因組在時(shí)間和空間上的選擇性表達(dá),通過不同基因表達(dá)的開啟或關(guān)閉,終產(chǎn)生標(biāo)志性蛋白質(zhì)。細(xì)胞誘導(dǎo)是指將一群不同類型或者形態(tài)結(jié)構(gòu)、功能特征存在差異的細(xì)胞通過生物學(xué)、物理學(xué)等手段,將之轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂邢嗨?相同形態(tài)結(jié)構(gòu)、功能特征的細(xì)胞群體的過程。
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