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病理染色-Masson
大鼠組織Masson染色效果
大鼠心梗Masson染色效果
Masson染色是顯示膠原纖維分布的經(jīng)典染色方法,利用染色的兩種不同分子量的陰離子在組織滲透性的差異,根據(jù)不同的滲透性能差異,區(qū)分出不同的組織成分。經(jīng)Masson染色后,膠原纖維呈現(xiàn)藍(lán)色,肌纖維紅色,細(xì)胞核藍(lán)黑色。
Masson染色可用作心梗模型、肺纖維化、肝纖維化以及纖維化模型的定性與膠原纖維沉積的半定量分析。
病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色常見染色介紹透射電鏡檢測:通過電子束穿透細(xì)胞和組織,從而可以觀察細(xì)胞內(nèi)的超微結(jié)構(gòu)。其放大倍數(shù)更大,真空要求也更高。透射電子顯微鏡可以看到在光學(xué)顯微鏡下無法看清的小于0.2nm的亞顯微結(jié)構(gòu)或超微結(jié)構(gòu)。電子顯微鏡技術(shù)的應(yīng)用是建立在光學(xué)顯微鏡的基礎(chǔ)之上的,光學(xué)顯微鏡的分辨率為0.2μm,透射電子顯微鏡的分辨率為0.2nm,也就是說透射電子顯微鏡在光學(xué)顯微鏡的基礎(chǔ)上放大了1000倍。透射電鏡的電子束通過樣品后由物鏡成像于中間鏡上,瀘州染色,再通過中間鏡和投影鏡逐級放大,成像于熒光屏或照相干版上,分辨細(xì)微物質(zhì)結(jié)構(gòu);能在看到表面的圖像的同時也看到內(nèi)層物質(zhì)。
用于電鏡檢查的標(biāo)本必須制成50~100nm的超薄切片。常用的切片方法有:超薄切片法、冷凍超薄切片法、冷凍蝕刻法、冷凍斷裂法等。對于液體樣品,alp染色,通常是掛預(yù)處理過的銅網(wǎng)上進(jìn)行觀察。南京英瀚斯,病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺。
病理實(shí)驗(yàn)外包,南京英瀚斯可開展冰凍切片熒光染色1. 冰凍切片室溫晾干15 min,可用含10%正常山羊的PBS室溫封閉切片1小時(此步可不洗)。2. 滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗或一抗工作液(的量視組織大小而定,pas染色,原則是可以均勻覆蓋組織面,且保證整個過程中不會使組織干涸)。3. 將切片放在加了PBS的組化濕盒,室溫孵育2小時或4℃過夜。4. 第二天先將濕盒放到37℃回溫1 h,然后吸取片上的一抗進(jìn)行回收,將切片插入到小染缸PBS沖洗。5. 滴加用PBS稀釋好的二抗(避光)置于分子雜交箱中37℃孵育1小時?;厥斩梗衅糜谌靖變?nèi),gus染色,PBS洗5 min×3次。6. 滴加DAPI工作液染核,室溫10~20 min(工作濃度0.1%染色15 min)。7. 回收DAPI,滴加5-10 μl 抗熒光衰減封或中性樹膠,用處理干凈的蓋玻片封片,即可到熒光顯微鏡或者共聚焦顯微鏡下。8. 做好的片放在切片盒內(nèi),置于4℃冰箱,可保存一周左右。
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