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多克隆抗體的制備一般包括以下幾個(gè)步驟:
1、制備抗原。
2、選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。
3、動(dòng)物免疫。
4、試取血進(jìn)行測(cè)試,看看是否成功免疫。
5、如果成功免疫,kill實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。包括純度以及特異性。
具體操作與制備原理可以咨詢武漢紐斯特生物科技有限公司(WuhanNewEastBiotechonologyCo.Ltd)!
不同的抗原制備的抗體,要求的效價(jià)不一。鑒定效價(jià)的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng)、瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),活性構(gòu)型特異性抗體定制服務(wù),一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來鑒定。
抗原通常是由多個(gè)抗原決定簇組成的,由一種抗原決定簇刺激機(jī)體,由一個(gè)B淋巴細(xì)胞接受該抗原刺激所產(chǎn)生的抗體稱之為單克隆抗體(MonoclonalAntibody)。
單克隆抗體問世以來,由于其獨(dú)有的特征已迅速應(yīng)用于醫(yī)學(xué)很多領(lǐng)域。
單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)
(1)雜交瘤可以在體外“l(fā)asting”地存活并傳代,只要不發(fā)生細(xì)胞株的基因突變,就可以不斷地生產(chǎn)高特異性、高均一性的抗體。
(2)可以用相對(duì)不純的抗原,獲得大量高度特異的、均一的抗體。
(3)由于可能得到“infinite quantity”的均一性抗體,所以適用于以標(biāo)記抗體為特點(diǎn)的免疫學(xué)分析方法,如IRMA和ELISA等。
(4)由于單克隆抗體的高特異性和單一生物學(xué)功能,可用于體內(nèi)的radioactive 免疫顯像和免疫導(dǎo)向 treatment。
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