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病理實驗外包,病理染色組織處理的要求:恰當?shù)慕M織處理是做好組化染色的先決條件,也是決定染色成敗的內部因素,透射電鏡和掃描電鏡的區(qū)別,在組織細胞材料準備的過程中,不僅要求保持組織細胞形態(tài)完整,更要保持組織細胞的抗原 性不受損或彌漫,防止組織自溶。如果出現(xiàn)自溶壞死的組織,抗原已經(jīng)丟失,即使用很靈敏的檢測和高超的技術,透射電鏡,也很難檢出所需的抗原,反而往往由于組織的壞死或制片時的刀痕擠壓,在上述區(qū)域易出現(xiàn)假陽性結果。
組織及時取材和固定
組織標本及時的取材和固定是做好組化染色的關鍵步,是有效防止組織自溶壞死,抗原 丟失的開始,離體組織應盡快的進行取材,好2h內,取材時所用的刀應銳利,要一刀下去切開組織,掃描電鏡原理,不可反復切拉組織,造成組織的擠壓,組織塊大小要適中,一般在2.5cm×2.5cm×0.2cm,切記取材時組織塊寧可面積大,千萬不能厚的原則,(也就是說組織塊的面積可以大到3cm×5cm,但組織塊的厚度千萬不能超過0.2cm,否則將不利于組織的均勻固定)。固定液快速滲透到組織內部使組織蛋白能在一定時間內迅速凝固。從而完好的保存抗原和組織細胞形態(tài)。
病理實驗外包,病理染色fish染色介紹,熒光原位雜交技術(fluorescence in situ hybridization),簡稱FISH。 是利用熒光標記的特異核酸探針與細胞內相應的靶DNA分子或RNA分子雜交,通過在熒光顯微鏡或共聚焦激光掃描儀下觀察熒光信號,來確定與特異探針雜交后被染色的細胞或細胞器的形態(tài)和分布,或者是結合了熒光探針的DNA區(qū)域或RNA分子在染色體或其他細胞器中的定位。FISH常使用的靶序列是16S rRNA,根據(jù)rRNA目標區(qū)域可設計寡核苷酸探針,進行種屬特異性鑒定;將處理好的樣品置于熒光顯微鏡下,選擇分散較好的區(qū)域來觀察。三色(或者更多)熒光激發(fā)下,觀察到不同顏色的熒光圖像。通常選用20X物鏡來掃描樣品雜交區(qū)域,40X或100X物鏡下觀察樣品,從一定的方向進行計數(shù),并對計數(shù)情況進行分析。南京英瀚斯,淮安掃描電鏡,病理染色實驗服務平臺。
掃描電鏡
掃描電鏡是介于透射電鏡和光學顯微鏡之間的一種微觀形貌觀察手段,利用極狹窄的電子束去掃描樣品,通過電子束與樣品的相互作用產(chǎn)生各種效應從而微觀成像,其成像富有立體感,利用掃描電鏡我們可直接觀察各種樣品表面的細微結構。
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