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11.如何溶解引物?
答:干燥后的引物質(zhì)地非常疏松,開蓋前好離心一下,或管垂直向上在桌面上敲敲,將引物粉末收集到管底。根據(jù)計算出的體積加入去離子無菌水或10mM Tris pH7.5緩沖液,室溫放置幾分鐘,振蕩助溶,離心將溶液收集到管底。溶解引物用的水一般不要用蒸餾水,因為有些蒸餾水的pH值比較低(pH4-5),pcr檢測,引物在這種條件下不穩(wěn)定。
12.如何保存引物?
答:引物合成后,經(jīng)過一系列處理和純化步驟,旋轉(zhuǎn)干燥而成片狀物質(zhì)。引物在溶解前,室溫狀態(tài)下可以長期保存。溶解后的引物-20度可以長期保存。如果對實驗的重復(fù)性要求較高,合成的OD數(shù)較大,建議分裝,避免反復(fù)凍融。修飾熒光引物需要避光保存。
單細胞RNA測序
單細胞RNA測序也稱scRNA-Seq。通常而言,一般的組織細胞RNA-seq實驗會產(chǎn)生1000萬個讀數(shù),如果一個基因的頻率超過50RPKM,即每百萬讀數(shù)中每千個堿基中超過50個,這一基因即被認為有表達。泊松分布下,1kb長的基因有超過500個讀數(shù)和4%的小變異系數(shù),即CV值;哺乳動物細胞通產(chǎn)含有200,000個mRNA,因此至少要用50個單細胞一起才能到達小CV值;考慮到逆轉(zhuǎn)錄的效率和環(huán)境干擾等因素,為得到準確的表達和細胞種類的識別,需要使用的細胞數(shù)量實際要更多。
LncRNA芯片
Long non-coding RNAs(lncRNAs)是一類轉(zhuǎn)錄本長度超過200 nt的功能性非編碼RNA分子。目前的研究已證實,lncRNA參與X染色體沉默,fish檢測,基因組印記以及染色質(zhì)修飾,轉(zhuǎn)錄ji活,徐州pcr,轉(zhuǎn)錄干擾,核內(nèi)運輸?shù)榷喾N重要調(diào)控過程。隨著對lncRNA在哺乳動物進化及人類疾病發(fā)生和發(fā)展中作用的日益關(guān)注,lncRNA調(diào)控機制已成為當前遺傳學(xué)研究的熱點問題。
篩選出差異表達的lncRNA是研究其在人類疾病發(fā)生中所扮演角色的基礎(chǔ)。富衡生物為用戶提供高通量的lncRNA芯片進行l(wèi)ncRNA表達譜分析,該芯片基于Agilent的SurePrint技術(shù)生產(chǎn),實驗。
技術(shù)優(yōu)勢
信息覆蓋廣泛:覆蓋了多個quan威lncRNA數(shù)據(jù)庫發(fā)布的數(shù)據(jù);提供人,小鼠,大鼠的lncRNA檢測。
lncRNA和mRNA同時檢測:芯片上包含有的lncRNA和新的mRNA序列檢測探針。一次芯片實驗可同時對lncRNA和mRNA進行分析。
平臺成熟可靠:采用Agilent原位噴墨合成技術(shù),了高檢測靈敏度和特異性。
數(shù)據(jù)分析:提供lncRNA和mRNA表達譜差異分析和功能分析,以及二者的關(guān)聯(lián)分析。
企業(yè): 南京英瀚斯生物科技有限公司
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