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5. 剝奪桿睡眠剝奪法
在標(biāo)準實驗室籠中采用間隙性的剝奪桿掃描進行觸覺刺激來干擾自由行為的小鼠。該方法防止了人類接觸和干預(yù)對睡眠剝奪的影響,并且在整個睡眠剝奪過程期間小化身體活動。此外,該程序準確且可預(yù)測。實驗室動物從小都是在飼養(yǎng)籠中長大,基于實驗室飼養(yǎng)籠使得動物能夠保持在正常的社會環(huán)境中實施了一種相對無壓力的方法來誘導(dǎo)動物睡眠剝奪模型,從而避免了外界環(huán)境及其他因素對睡眠剝奪的影響。此外,基于飼養(yǎng)籠式的睡眠剝奪儀易于組裝和清洗,設(shè)計更加地人性化。
2強迫運動睡眠剝奪法
此類睡眠剝奪方法形式多樣,在腦電監(jiān)護情況下可行全部的睡眠剝奪和選擇性的睡眠剝奪。其共同特點是通過動力裝置迫使大鼠不停地運動,從而達到睡眠剝奪的目的。此類方法的優(yōu)點是睡眠剝奪效果明顯,睡眠剝奪的時間及強度易于掌握,重復(fù)性好,無須實驗人員隨時觀察實驗情況,減輕了實驗人員工作強度。缺點是長時間運動引起機體的一系列應(yīng)激反應(yīng)可能干擾睡眠剝奪的實驗結(jié)果,現(xiàn)選取其中兩種有代表意義的方法介紹如下
2.1水平轉(zhuǎn)盤睡眠剝奪法
此方法應(yīng)用廣泛,于 1983 年先應(yīng)用在睡眠剝奪實驗中,實驗裝置由一個電腦控制臺、一個水平轉(zhuǎn)盤及兩個開放的長方形有機玻璃缸組成,轉(zhuǎn)盤直徑為 46 cm,在電腦控制下可以按順時針逆時針方向隨機水平轉(zhuǎn)動! 兩只有機玻璃缸的尺寸均為長60 cm ,寬20.5 cm,高 60 cm 。在距離缸底 5 cm 處的缸側(cè)壁開有一條縫隙,使轉(zhuǎn)盤的一半能分別從縫隙伸入兩只玻璃缸中并能隨意轉(zhuǎn)動。缸底留置水約 2 cm 深,動物模型構(gòu)建公司,轉(zhuǎn)盤離水面約3 cm 實驗前1周將睡眠剝奪大鼠頭頸部植入微電極" 并將微電極與電腦控制臺相連,將大鼠放在轉(zhuǎn)盤上適應(yīng)環(huán)境1周,每天約1 h讓大鼠習(xí)慣在轉(zhuǎn)盤上活動,進水,進食等。實驗時將實驗組的大鼠及對照組的大鼠分別置于兩只缸中的轉(zhuǎn)盤上,當(dāng)電腦通過微電極監(jiān)測到實驗組大鼠進入慢波或快波睡眠的腦電信號后,立即發(fā)出指令使轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)動 6 s(6 s內(nèi)轉(zhuǎn)動 1/3 圈),當(dāng)大鼠被轉(zhuǎn)到玻璃缸壁時,動物模型制作,因被玻璃缸壁擋住而可能掉入水中,每次在實驗組睡眠剝奪大鼠進入睡眠時轉(zhuǎn)盤即轉(zhuǎn)動 6 s,方向隨機,轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)動時兩只大鼠均被動地隨著轉(zhuǎn)盤移動。此方法一次只剝奪一只大鼠睡眠,寧夏動物模型,當(dāng)實驗組的睡眠剝奪大鼠在活動、進水、進食時轉(zhuǎn)盤并不轉(zhuǎn)動而此時對照組的大鼠則可趁機睡覺以彌補被剝奪的睡眠。此方法中睡眠剝奪組大鼠與對照組大鼠條件極其相似,因而可減少因?qū)嶒灄l件不同而所致的應(yīng)激反應(yīng)。
6. 八臂迷宮實驗方法根據(jù)實驗?zāi)康牡牟煌詫m臂的數(shù)目可不同,包括8、16、24、32、40和48臂迷宮。迷宮臂越少要求動物記住探究過的臂也越小,動物的行為操作就越簡單。增加臂的數(shù)目一方面增加了對動物空間記憶的要求,另一方面也引入了更多的、有必要考慮的干擾因素(例如過去的迷宮學(xué)習(xí)對目前所測記憶的影響)。所以,通常使用8臂迷宮,既可減少不必要的、過多臂的干擾,又可縮短訓(xùn)練和測試所花的時間。
7. 所用食物通常為小塊的、帶巧克力味(動物喜歡的味道之一)或甜味的早餐圈(每塊10mg);也可用液體食物(如巧克力奶或水)。后者對于測試某些影響動物對固體食物吞咽的尤為實用。
8. 影響動物迷宮操作主要有兩大因素:對迷宮或觀察者的恐懼與動物探究習(xí)性和已知放在迷宮臂內(nèi)食物的驅(qū)使??謶忠蛩剡^強會阻止動物的迷宮操作,使動物始終停留在迷宮的某一個地方而不去探究。缺乏對食物的渴求也會產(chǎn)生類似結(jié)果,增加對動物的撫摸,必要時加高迷宮臂的側(cè)墻,有助于減少動物的恐懼。如食物的驅(qū)使作用不足,可減少食物量,動物行為學(xué),但必須同時監(jiān)測體重和一般身體狀況。通常大鼠體重不應(yīng)低于禁食前的80%;對多數(shù)大鼠,體重降低15%即可。
9. 與水迷宮不同,臂迷宮適合反復(fù)測試或長期記憶的測試。一般認為,工作記憶代表短期記憶,參考記憶代表長期記憶。
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