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基本檢測(cè)原理是首先將待檢產(chǎn)物和兩種檢測(cè)物混合,特異性結(jié)合后形成帶有兩種標(biāo)記(生物素和FITC)的復(fù)合物;隨后將該復(fù)合物滴加到試紙條的加樣區(qū),與加樣區(qū)的膠體金顆粒結(jié)合,新形成的復(fù)合物在層析膜擴(kuò)散作用下擴(kuò)散至檢測(cè)線,只有標(biāo)記有生物素的復(fù)合物會(huì)被生物素配體捕獲,等溫核酸試劑盒公司,從而使檢測(cè)線“顯色”,而未結(jié)合檢測(cè)物的膠體金顆粒會(huì)繼續(xù)擴(kuò)散至質(zhì)控線并捕獲進(jìn)而使質(zhì)控線“顯色”。
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數(shù)字PCR技術(shù)是第三代PCR技術(shù),是一種核酸分子定量的檢測(cè)方法。現(xiàn)階段,核酸分子的定量有三種方法:光度法基于核酸分子的吸光度來定量;實(shí)時(shí)熒光定量PCR基于Ct值,即指可以檢測(cè)到熒光值對(duì)應(yīng)的循環(huán)數(shù);數(shù)字PCR作為新定量技術(shù),主要采用當(dāng)前分析化學(xué)熱門研究領(lǐng)域的微流控或微滴化方法,借助專門設(shè)備將50微升左右核酸溶液樣本大量稀釋后,分割成了近10萬個(gè)液滴分散至芯片的微反應(yīng)器或微滴中,單一液滴為獨(dú)立反應(yīng)單元,每個(gè)反應(yīng)器的核酸模板數(shù)少于或者等于1個(gè)。
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核酸提取技術(shù)亦可分為2部分,<樣本裂解>與<核酸純化>,目前市面上常見的樣本裂解技術(shù)有<物理加熱裂解>、<蛋白酶K裂解>、<一步法核酸提取>,核酸純化技術(shù)有<梯度離心法>、<硅膠模柱法>、<磁珠法>。因此對(duì)于核酸提取技術(shù)的不同,樣本裂解及核酸純化環(huán)節(jié)不盡相同,等溫核酸試劑盒價(jià)格,操作繁瑣程度不同,提取效率、核酸的純度亦會(huì)不同。而復(fù)雜的操作更易導(dǎo)致氣溶膠污染,等溫核酸試劑盒,帶來風(fēng)險(xiǎn)。因此,選擇合適的提取技術(shù),對(duì)當(dāng)前疫情防控至關(guān)重要。
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