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等溫核酸試劑盒
RNA試劑盒使用方法
使用時一定要根據(jù)自己的實驗需要購買提取試劑盒, 如果不是試劑盒,或許能提出RNA,但不能確保其質(zhì)量以及完整性,會影響RT-PCR、Northern blot、Dot blot、Real time RT PCR、芯片分析、polyA 篩選、體外翻譯、RNase 保護(hù)分析等后續(xù)實驗的結(jié)果。
當(dāng)前提取效果好的是QIANGEN公司生產(chǎn)的RNA提取試劑盒,但其售價較高,湖北等溫核酸試劑盒,單次實驗費(fèi)用花費(fèi)太大,對精度要求不高的實驗沒有必要購買,等溫核酸試劑盒哪家好,當(dāng)然還有其它的進(jìn)口試劑盒,但是均存在價格高、訂貨周期長的問題(如果碰上國內(nèi)無貨的時候,要從國外發(fā)貨,會等很長一段時間)。普通的提取實驗用國產(chǎn)的試劑盒就足以,價格不高,基本上各地均有現(xiàn)貨,等溫核酸試劑盒報價,如天根(目前國內(nèi)生產(chǎn)的試劑盒中銷售面比較廣的一種)等,其價格比進(jìn)口試劑盒要便宜許多,且效果還不錯,還可以。
當(dāng)然,就RNA的提取而言,不一定試劑盒的提取效果就非常好,其實采用一些經(jīng)典的RNA提取方法,效果也很不錯,如:TRIZOL、EDTA等,只是試劑盒使用方便,經(jīng)典的方法操作復(fù)雜一些。
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目前疑似病例與確診病例已逾6萬例,核酸檢測需求量與日俱增。另外,湖北省增加“臨床診斷”分類,將疑似病例標(biāo)準(zhǔn)放寬,需要更多保質(zhì)保量的核酸檢測產(chǎn)品投入應(yīng)用。國家審核批準(zhǔn)的新型冠狀病毒核酸檢測產(chǎn)品大多采取的是“實時熒光RT-PCR檢測”方法,RT-PCR需要核酸提取、擴(kuò)增2個步驟完成,但目前市面上部分注冊產(chǎn)品僅有擴(kuò)增產(chǎn)品,沒有核酸提取產(chǎn)品,缺乏系統(tǒng)的核酸檢測方案,無法保證核酸檢測的系統(tǒng)性、準(zhǔn)確性及可靠性,也間接造成了核酸檢測遭到社會公眾質(zhì)疑的尷尬局面。因此,當(dāng)檢測產(chǎn)品投入后,可能還需匹配不同廠家的核酸提取試劑,對抗疫工作的開展產(chǎn)生了一定影響。
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FAQ
能否進(jìn)行熒光終點分析?
可以。這樣比較的是反應(yīng)開始時的熒光和反應(yīng)結(jié)束時的熒光,熒光增強(qiáng)意味著發(fā)生了擴(kuò)增。
4能否支持生物素或熒光標(biāo)記的寡核苷酸?
支持。在RPA反應(yīng)中,連有生物素或熒光團(tuán)的引物與未修飾的引物表現(xiàn)差不多。據(jù)悉還沒有發(fā)現(xiàn)任何差異。
5跑膠前需要回收RPA產(chǎn)物嗎?
需要。RPA反應(yīng)中的物質(zhì)會干擾瓊脂糖電泳,如果不進(jìn)行產(chǎn)物回收,跑出來的帶會出現(xiàn)拖尾。
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