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如何提高擴(kuò)增曲線的可重復(fù)性?
優(yōu)化擴(kuò)增曲線考慮以下因素: 對(duì)于低拷貝數(shù)模板,不穩(wěn)定擴(kuò)增可能是因?yàn)檫_(dá)到檢測(cè)限或者是反應(yīng)混勻程度不同(未混勻的反應(yīng)擴(kuò)增效率不佳)。另外,等溫核酸試劑盒價(jià)格,在低溫情況下存貯,重組酶和輔助蛋白在50%甘油情況下形成沉淀,也是可能導(dǎo)致不穩(wěn)定擴(kuò)增的原因。所以,20x核心反應(yīng)mix在室溫下解凍并震蕩渦旋將使其成為液體,不影響其功能,并且有效提高擴(kuò)增效率。不穩(wěn)定擴(kuò)增也可能是因?yàn)閙aster mix量不足,在加入體系前,等溫核酸試劑盒哪家好,用戶必須保證震蕩后20x核心反應(yīng)組分均一。
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重組酶聚合酶擴(kuò)增技術(shù)是近年來建立起的一種新的核酸恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù),等溫核酸試劑盒報(bào)價(jià),具有操作簡(jiǎn)單、靈敏度高、特異性強(qiáng)、可在短時(shí)間內(nèi)快速擴(kuò)增出目的片段等優(yōu)點(diǎn),在動(dòng)物疾病早期診斷、現(xiàn)地檢測(cè)、進(jìn)出口快速檢疫等方面具有良好的應(yīng)用前景。通過綜述RPA技術(shù)及其在病毒性豬病快速檢測(cè)中的應(yīng)用研究進(jìn)展,以期為更好地防控豬病提供參考。
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RPA的特性:快速檢測(cè) 15min進(jìn)行單分子檢測(cè)試驗(yàn), 簡(jiǎn)易包裝 穩(wěn)定凍干形式試劑. 無需熱循環(huán)過程 擺脫任何儀器束縛. 便攜 設(shè)備要求低,等溫核酸試劑盒,貧瘠條件亦能 完成檢測(cè)
RPA能實(shí)現(xiàn)多重化嗎
可以。需要注意的是,RPA反應(yīng)的引物總量(nmol)不要超標(biāo)太多。如果在一個(gè)反應(yīng)中使用兩個(gè)以上的擴(kuò)增引物,就應(yīng)該控制不同引物的量。另外,我們應(yīng)當(dāng)事先考慮好檢測(cè)多個(gè)擴(kuò)增事件的探針、設(shè)備以及熒光團(tuán)的兼容性。
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