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等溫核酸試劑盒
數(shù)字PCR技術(shù)是第三代PCR技術(shù),是一種核酸分子定量的檢測方法?,F(xiàn)階段,核酸分子的定量有三種方法:光度法基于核酸分子的吸光度來定量;實(shí)時熒光定量PCR基于Ct值,即指可以檢測到熒光值對應(yīng)的循環(huán)數(shù);數(shù)字PCR作為新定量技術(shù),主要采用當(dāng)前分析化學(xué)熱門研究領(lǐng)域的微流控或微滴化方法,借助專門設(shè)備將50微升左右核酸溶液樣本大量稀釋后,分割成了近10萬個液滴分散至芯片的微反應(yīng)器或微滴中,單一液滴為獨(dú)立反應(yīng)單元,每個反應(yīng)器的核酸模板數(shù)少于或者等于1個。
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提取技術(shù)是系統(tǒng)性核酸檢測方案的關(guān)鍵目前大量的核酸檢測試劑投入疫情,但是防控效率、檢測效率卻未有明顯提升。在央視記者采訪前線檢驗(yàn)科工作人員的報(bào)道中,也指出目前核酸提取環(huán)節(jié)存在差異,影響了檢測能力的提升。
除前期的樣本、轉(zhuǎn)運(yùn)、滅活等處理,核酸檢測產(chǎn)品在檢測過程中主要分為2個步驟,即核酸提取、擴(kuò)增檢測。擴(kuò)增檢測部分主要取決于前步驟核酸提取的純度,以及擴(kuò)增儀器的性能,因此核酸檢測產(chǎn)品本身的差異性關(guān)鍵在于“核酸提取”這一步。
試劑盒
英國TwistDx Inc公司開發(fā)的重組酶聚合酶擴(kuò)增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA)--被稱為是可以替代PCR的核酸檢測技術(shù),目前新的等溫?cái)U(kuò)增檢測技術(shù)。以此為基礎(chǔ)的TwistAmp? 核酸擴(kuò)增產(chǎn)品,能夠在15分鐘內(nèi)進(jìn)行常溫下的單分子核酸檢測。該技術(shù)對硬件設(shè)備的要求很低,特別適合用于體外診斷、獸醫(yī)、食品安全、生物防御和農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域。常規(guī)PCR必須經(jīng)過變性、退火、延伸三個步驟,而PCR儀本質(zhì)上就是一個控制溫度升降的設(shè)備。RPA反應(yīng)的適宜溫度在37°C - 42°C之間,TwistAmp Liquid Exo哪家好,無需變性,在常溫下即可進(jìn)行。這無疑能大大加快PCR的速度。此外,由于不需要溫控設(shè)備,RPA可以真正實(shí)現(xiàn)便攜式的快速核酸檢測。據(jù)介紹,TwistAmp Liquid Exo,RPA檢測的靈敏度很高,能夠?qū)⒑哿康暮怂?尤其是DNA)模板擴(kuò)增到可以檢出的水平,從單個模板分子得到大約1012擴(kuò)增產(chǎn)物。而且RPA還用不著復(fù)雜的樣品處理,適用于無法提取核酸的實(shí)地檢測。RPA不僅可以對擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行終點(diǎn)檢測,還可以對擴(kuò)增過程進(jìn)行實(shí)時監(jiān)控,TwistAmp Liquid Exo價(jià)格,甚至可以通過試紙條(側(cè)流層析試紙條LFD)讀取結(jié)果。
目前,TwistAmp Liquid Exo代理,TwistAmp? 試劑盒的擴(kuò)增子長度在500bp以內(nèi)。不過,經(jīng)過特別優(yōu)化的RPA擴(kuò)增,也可以生成更長的擴(kuò)增產(chǎn)物,或者減慢擴(kuò)增速度(便于定量),甚至在更低的溫度下進(jìn)行反應(yīng)。
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