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重組酶聚合酶擴增技術(shù)是近年來建立起的一種新的核酸恒溫擴增技術(shù),具有操作簡單、靈敏度高、特異性強、可在短時間內(nèi)快速擴增出目的片段等優(yōu)點,在動物疾病早期診斷、現(xiàn)地檢測、進出口快速檢疫等方面具有良好的應(yīng)用前景。通過綜述RPA技術(shù)及其在病毒性豬病快速檢測中的應(yīng)用研究進展,以期為更好地防控豬病提供參考。
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重組酶聚合酶擴增技術(shù)(RPA)是2006年由英國科學(xué)家研發(fā)的一種核酸恒溫擴增技術(shù)。它是利用多種酶參與,在體外模擬生物體內(nèi)DNA復(fù)印,恒溫條件下短時間內(nèi)實現(xiàn)靶基因大量擴增,既可以擴增DNA,等溫核酸試劑盒報價,也可以擴增RNA。RPA技術(shù)具有恒溫、快速、便攜、靈敏度高、特異性強和操作簡單等優(yōu)點,等溫核酸試劑盒總代理,是目前很有望替代PCR技術(shù)的核酸等溫擴增方法,在基層現(xiàn)場診斷中,具有廣闊的應(yīng)用前景。
相對來說RPA是很好的恒溫擴增法,可在較低溫下恒溫擴增,不需要復(fù)雜儀器設(shè)備,操作簡單、反應(yīng)時間短,特異性好、靈敏度高,等溫核酸試劑盒價格,可采用電泳、熒光、側(cè)向流試紙等多種方式檢測擴增產(chǎn)物
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FAQ
能否對模板進行定量?
可以。擴增子達到可檢出水平的時間,依賴于反應(yīng)起始時的模板量。初始模板的拷貝越多,擴增子就越快達到可檢出水平。不過,這種定量需要精心的實驗安排,等溫核酸試劑盒,確保對照反應(yīng)是同時開始的。舉例來說,可以利用鎂離子的添加時間進行控制。因為鎂離子一旦進入體系,RPA反應(yīng)就會開始。
此外,較慢的擴增過程有助于的定量。我們可以通過調(diào)整反應(yīng)條件或引物設(shè)計來減慢RPA的反應(yīng)速度。
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