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RPA的原理;
重組酶與引物結(jié)合形成的蛋白-DNA復(fù)合物,能在雙鏈DNA中尋找同源序列。一旦引物定位了同源序列,就會(huì)發(fā)生鏈交換反應(yīng)形成并啟動(dòng)DNA合成,對模板上的目標(biāo)區(qū)域進(jìn)行指數(shù)式擴(kuò)增。被替換的DNA鏈與SSB結(jié)合,等溫核酸試劑盒價(jià)格,防止進(jìn)一步替換。在這個(gè)體系中,由兩個(gè)相對的引物起始一個(gè)合成事件。整個(gè)過程進(jìn)行得非???,等溫核酸試劑盒哪家好,一般可在十分鐘之內(nèi)獲得可檢出水平的擴(kuò)增產(chǎn)物。
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重組酶聚合酶擴(kuò)增(RPA)技術(shù),是近幾年出現(xiàn)的有望替代PCR的新的核酸擴(kuò)增技術(shù)。RPA技術(shù)由Piepenburg等于2006年創(chuàng)立,等溫核酸試劑盒,該技術(shù)基于重組酶聚合酶介導(dǎo)的擴(kuò)增原理,體外模擬生物體內(nèi) DNA 復(fù)印,在恒溫條件下即可對目的片段進(jìn)行擴(kuò)增,特別適用于快速檢測,特別適用于體外診斷、獸醫(yī)、食品安全、生物安全、農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域,已被成功應(yīng)用到多種病原的快速檢測上。
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FAQ
能否對模板進(jìn)行定量?
可以。擴(kuò)增子達(dá)到可檢出水平的時(shí)間,依賴于反應(yīng)起始時(shí)的模板量。初始模板的拷貝越多,擴(kuò)增子就越快達(dá)到可檢出水平。不過,這種定量需要精心的實(shí)驗(yàn)安排,等溫核酸試劑盒代理,確保對照反應(yīng)是同時(shí)開始的。舉例來說,可以利用鎂離子的添加時(shí)間進(jìn)行控制。因?yàn)殒V離子一旦進(jìn)入體系,RPA反應(yīng)就會(huì)開始。
此外,較慢的擴(kuò)增過程有助于的定量。我們可以通過調(diào)整反應(yīng)條件或引物設(shè)計(jì)來減慢RPA的反應(yīng)速度。
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