【廣告】
脂肽類
Arrebola等用提取及色譜分析法分析解淀粉芽孢桿菌PPCB004抑菌物質(zhì)的成分,發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生的主要抑菌物質(zhì)為伊枯草菌素A。Hiradate等從桑葉中分離得到1株解淀粉芽孢桿菌RC-2,其細(xì)菌培養(yǎng)上清液對桑病具有預(yù)防作用,用液相色譜分析分離出7種抗真菌化合物,譜(NMR)和快速原子轟擊質(zhì)譜(FAB-MS)方法分析其化學(xué)結(jié)構(gòu),發(fā)現(xiàn)7種物質(zhì)均為伊枯草菌素,其中化合物7為一種新的伊枯草菌素,β-側(cè)鏈分子中具有—(CH2)10CH(CH3)CH2CH3基團(tuán)。Koumoutsi等研究了解淀粉芽孢桿菌FZB42由基因引導(dǎo)、非核糖體合成的生物活性環(huán)脂肽的結(jié)構(gòu)與功能,發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生抑菌效果的主要物質(zhì)為表面活性物質(zhì)(surfactin)、芬芥素(fengycin)及芽孢菌素D(bacillomycinD),兩兩相互作用共同抑制病原真菌的生長。Souto等從解淀粉芽孢桿菌BNM122代謝產(chǎn)物中分離得到具有抗植物病原真菌如鐮孢菌、絲核菌的物質(zhì),經(jīng)氫譜(1H-NMR)和薄層色譜分析發(fā)現(xiàn)其中含有脂肽類物質(zhì)及伊枯草菌素類似物。
解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)為芽孢桿菌屬,是一種與枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)親緣性很高的細(xì)菌。該菌為革蘭氏陽性、兼性厭氧的桿狀細(xì)菌;在自然界中分布廣泛,農(nóng)業(yè)解淀粉芽孢桿菌采購,不但可在土壤、植物根際體表、深海水等外界環(huán)境中存在,同時(shí)在植物體內(nèi)也很常見;其適生長溫度為28~30℃,適宜生長的pH6.5~7。 解淀粉芽孢桿菌的菌落在L-B培養(yǎng)基和牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上呈淡黃色不透明狀,表面粗糙,有隆起,邊緣不規(guī)則。在實(shí)際生產(chǎn)過程中菌株的挑選,培養(yǎng)基成分、培養(yǎng)細(xì)節(jié)等都會影響菌的數(shù)量及代謝產(chǎn)物的分泌,鄂州農(nóng)業(yè)解淀粉芽孢桿菌,不適宜的培養(yǎng)條件和配方,會導(dǎo)致菌株生長不良,胞外活性產(chǎn)物代謝量減少,農(nóng)業(yè)解淀粉芽孢桿菌廠家,這也是現(xiàn)階段市場上眾多“解淀粉芽孢桿菌”產(chǎn)品下效果參差不齊的主要原因。因此,在生產(chǎn)發(fā)酵過程中,應(yīng)有針對性地對培養(yǎng)基營養(yǎng)、溫度、轉(zhuǎn)速及培養(yǎng)基pH值、接菌量、供氧量,光照等因素調(diào)節(jié)進(jìn)行嚴(yán)格把控。
菌株的鑒定:對篩選得到的乳酸菌進(jìn)行16S rDNA序列分析,確定其種屬。將活化好的菌液,進(jìn)行菌株的全基因組脫氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid, DNA)的提取[16],然后對基因組DNA的16S rDNA區(qū)域進(jìn)行PCR擴(kuò)增,上游引物27F序列5′-AGAGTTTGATCCTGGCCTCA-3′,下游引物1492R序列:5′-GGTTACCTTGTTACGACTT-3′,農(nóng)業(yè)解淀粉芽孢桿菌批發(fā),擴(kuò)增片段為1 500 bp。PCR體系50 μL:10×buffer 5 μL;脫氧核糖核苷酸三磷酸(deoxy-ribonucleoside triphosphate, dNTP) 5 μL;上游引物(25 μmol/L)0.5 μL;下游引物(25 μmol/L)0.5 μL;Taq DNA 聚合酶(250 U)0.5 μL;模板DNA 1.5 μL ;ddH2O 37 μL。PCR擴(kuò)增條件為:95 ℃ 3 min;95 ℃ 10 s;55 ℃ 30 s;72 ℃ 1 min;72 ℃ 5 min,2~4反應(yīng)步驟進(jìn)行30個(gè)循環(huán)。擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳檢測其純度及濃度,將達(dá)到測序要求的擴(kuò)增產(chǎn)物送至上海華大基因進(jìn)行測序,將測序結(jié)果在美國國立生物技術(shù)信息中心(national center for biotechnology information, NCBI)上BLAST進(jìn)行比對,并確定其種屬。
企業(yè): 天津開發(fā)區(qū)坤禾生物技術(shù)有限公司
手機(jī): 13116179179
電話: 022-65157666
地址: 天津開發(fā)區(qū)漢沽現(xiàn)代產(chǎn)業(yè)區(qū)衡山路66號