地衣芽孢桿菌使用后可產生內生芽孢

地衣芽孢桿菌使用后可產生內生芽孢，耐熱抗逆性強，在土壤和植物的表面普遍存在。是植物體內常見的一種內生菌，對人畜無毒無害，不污染環(huán)境。生長速度快、營養(yǎng)需求簡單，在植物的表面易于存活、定殖與繁殖，生產工藝簡單，制劑穩(wěn)定，施用方便，儲存期長。因此是一種理想的生防微生物。

1、生防機制對植物病菌的作用機制和方式是多樣的，主要包括競爭作用、抗生作用、溶菌作用和促進植物生長等幾個方面。

1.1 競爭作用競爭方式，主要包括營養(yǎng)競爭和位點競爭。營養(yǎng)和空間位點的競爭是指存在于同一微小生物環(huán)境中的兩個或兩個以上微生物之間爭奪這一環(huán)境內的空間、營養(yǎng)、氧氣等的現(xiàn)象。地衣芽抱桿菌具有較強的競爭和定殖能力，從而搶占病原菌的侵染位點，消耗其周圍養(yǎng)分，地衣芽孢桿菌多少錢，阻止和干擾病原菌對植物葉面和其他的侵染，起到防病抑菌的作用。

1.2 抗生作用是指拈抗微生物通過產生代謝產物在低濃度下就能夠對病原微生物的生長和代謝產生抑制作用，從而來影響病原微生物的生存和活動。近半個世紀以來，人們從地衣芽孢桿菌不同菌株的代謝產物中分離純化了多種有效的物質。

1.3 地衣芽孢桿菌的溶菌作用主要表現(xiàn)在通過吸附在病原菌的菌絲上，并隨著菌絲生長而生長，地衣芽孢桿菌，而后產生溶菌物質造成原生質泄露，使得菌絲體斷裂，或者是產生物質通過溶解病原菌孢子的細胞壁或細胞膜，致使細胞壁穿孔、畸形等現(xiàn)象從而抑制孢子萌發(fā)。

飼料添加用量:

（200億cfu/g）

1.按全價飼料添加本產品計算：乳豬：500-800克/噸；仔豬、生長豬、育肥豬：300-500克/噸；種蛋禽：300-600克/噸；肉禽：200-500克/噸；反芻：1000-2000克/噸；

2．飲水用量：按250-500倍稀釋自由飲水。

3．飼料加工：按0.2-0.5％（疾病多發(fā)期1％）均勻拌入原料中，加工制粒。

4.成品飼料：按0.2-0.5％量（疾病多發(fā)期1％）用粘合物（如雞蛋、油脂、粘合劑）與顆粒飼料或冰鮮魚塊（糜）混合均勻，使地衣芽孢桿菌粘附在其表面，晾干后即可投喂。

注意事項

（1）使用時先預混，逐級稀釋，地衣芽孢桿菌報價，均勻混合于飼料中；

（2）啟封后盡快用完，未用完部分需及時扎緊包裝，注意防潮；

（3）產品不同批次顏色可能略有變化、假性結塊屬正常現(xiàn)象；

（4）開封后儲存過程中如有異味，地衣芽孢桿菌供應商，屬于部分微生物菌被發(fā)酵所致，不影響使用效果。

本品是一種安全、無毒、無副作用的新型微生態(tài)制劑，常規(guī)用量和加倍劑量均能耐受。

地衣芽孢桿菌的基因敲除

地衣芽孢桿菌基因敲除的方法在我們過去的中有描述（Cai et al.， 2016）。在這里，以構建cydB缺陷菌株為例。簡言之，以地衣芽孢桿菌WX‐02基因組DNA為模板，采用引物cydB‐KF1/R1和cydB‐KF2/R2擴增得到cydB基因的上游和下游同源臂，經(jīng)重疊擴展(SOE)‐PCR得到融合片段。融合片段入到限制酶位點XbaI/SacI酶切后的T2(2)‐Ori中。菌落PCR和DNA測序證實重組質粒(T2‐cydB)構建成功。

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