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武漢默沙克生物????科技有限公司是一家專門從事生物制劑研發(fā)與生產(chǎn)的企業(yè)。目前可提供各種抗1體、免疫學(xué)試劑盒、生化試劑、ELISA試劑盒、分子生物學(xué)試劑等多用途多屬種的高品質(zhì)產(chǎn)品,服務(wù)涉及分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)等生命科學(xué)領(lǐng)域。
3、 細(xì)胞培養(yǎng)上清
取細(xì)胞培養(yǎng)上清到離心管,1000×g離心20min,除去細(xì)胞碎片及雜質(zhì),取上清,-20℃或-80℃保存,避免反復(fù)凍融。
4、 細(xì)胞裂解液
1) 吸去培養(yǎng)板內(nèi)的培養(yǎng)基,用胰酶消化細(xì)胞,加適量培養(yǎng)基將細(xì)胞從培養(yǎng)板上吹下來。懸浮細(xì)胞可省略。
2) 收集細(xì)胞懸液,1000×g離心10min,棄去培養(yǎng)基,用預(yù)冷的PBS潤(rùn)洗3次。
3) 加入適量的預(yù)冷PBS或細(xì)胞裂解液(臨用前加入蛋白酶抑1制劑)重懸細(xì)胞。通常6孔板一個(gè)孔的細(xì)胞量需要150~250μL PBS重懸。
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1.3.4 敏感性
在測(cè)定血1清中某一物質(zhì)的含量時(shí),化學(xué)比色法的敏感度為mg/ml水平,酶反應(yīng)測(cè)定法的敏感度約為5~10μg/ml,免疫測(cè)定中凝膠擴(kuò)散法和濁度法的敏感度與酶反應(yīng)法相仿。標(biāo)記的免疫測(cè)定的敏感度可提高數(shù)千倍,達(dá)ng/ml水平。例如,用放1射免疫測(cè)定法或酶免疫測(cè)定法測(cè)定HBsAg,其敏感度可達(dá)0.1ng /ml。
1.4 免疫測(cè)定在臨床檢驗(yàn)中的應(yīng)用
由于各種抗原成份,包括小分子的半抗原,均可用以制備特異性的抗血1清或單克1隆抗1體,利用此抗1體作為試劑就可檢測(cè)標(biāo)本中相應(yīng)的抗原,因此免疫測(cè)定的應(yīng)用范圍極廣,在臨床檢驗(yàn)中可用于測(cè)定:
1) 體液中的各種蛋白質(zhì),包括含量極1少的蛋白質(zhì)如甲胎蛋白等。
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6.透蠟
放入二甲本和石蠟各半的混合液60min,再放入石蠟Ⅰ60分鐘、石蠟Ⅱ透蠟30分鐘。
透蠟的目的是除去組織中的透明劑(如二甲本等),SOD ELISA試劑盒,使石蠟滲透到組織內(nèi)部達(dá)到飽和程度以便包埋。透蠟時(shí)間根據(jù)組織大小而定。透蠟應(yīng)在恒溫箱內(nèi)進(jìn)行,并保持箱內(nèi)溫度在55-60℃左右,注意溫度不要過高,以免組織發(fā)脆。一般置于恒溫箱0.5h。
透蠟注意事項(xiàng)
(1)盡量保持在較低溫度中進(jìn)行,以石蠟不凝固為度;
(2)透蠟溫度要恒定,不可忽高忽低;
(3)操作要迅速,力求在1短的時(shí)間內(nèi)完成石蠟透入過程,以免引起組織變硬、變脆、收縮等。
企業(yè): 武漢默沙克生物科技有限公司
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