意義

在研究DNA分子原理的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種技術(shù)。其基本原理是兩條核苷酸單鏈片段，在適宜的條件下，能過氫鍵結(jié)合，植物原位雜交，形成DNA-DNA、DNA-RNA或 RNA-RNA 雙鍵分子的特點，應(yīng)用帶有標(biāo)記的（有性同位素，如3H、35S、32P、熒光素生物素、等非性物質(zhì)）DNA或RNA片段作為核酸探針，與組織切片或細胞內(nèi)待測核酸（RNA或DNA）片段進行雜交，然后可用自顯影等方法予以顯示，在光鏡或電鏡下觀察目的 mRNA或DNA 的存在并定位；用原位雜交技術(shù)，可在原位研究細胞合成某種多肽或蛋白質(zhì)的基因表達。此方法有很高的敏感性和特異性，可進一步從分子水平來探討細胞的功能表達及其調(diào)節(jié)機制。已成為當(dāng)今細胞生物學(xué)、分子生物學(xué)研究的重要手段。

分子病理學(xué)是一門新興學(xué)科，是在基因水平上用分子生物學(xué)技術(shù)研究疾病發(fā)生1發(fā)展的一個病理學(xué)分支學(xué)科。分子病理學(xué)進行的檢測通常稱之為基因檢測，即取檢測者的腫1瘤組織、胸水或血液等，經(jīng)提取和擴增其基因信息后，通過相應(yīng)的分子生物學(xué)技術(shù)，對被檢測者細胞中的DNA分子的基因信息進行檢測，分析他的基因狀態(tài)，從而對腫1瘤的診斷或治1療提供一定的幫助。 

 滴加封閉液：37℃30分鐘。甩去多余液體，不洗。

  .滴加生物素化鼠抗地1高辛：37℃ 60分鐘或室溫120分鐘。原位雜交用PBS洗5分鐘×4次。勿用其它緩沖液和蒸餾水洗滌。

滴加SABC：37℃20分鐘或室溫30分鐘。原位雜交用PBS洗5分鐘×3次。勿用其它緩沖液和蒸餾水洗滌。

滴加生物素化過氧化物酶：37℃20分鐘或室溫30分鐘。原位雜交用PBS洗5分鐘×4次。

DAB顯色：使用DAB顯色試劑盒—1ml蒸餾水加顯色劑Ａ，Ｂ，C各一滴，混勻，加至標(biāo)本上。一般顯色20-30分鐘。若無背景出現(xiàn)則可繼續(xù)顯色。也可自配DAB顯色劑后顯色。充分水洗。

.蘇1木素復(fù)染，充分水洗。

酒精脫水，二甲1苯透明，封片。

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