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一)、實驗室種子培養(yǎng)基**方法1、高壓蒸汽**鍋、手提式**鍋。容量小。2、立式或臥式**鍋。容量較大,一般能裝幾十瓶或幾百瓶。3、**柜。要和蒸汽鍋爐配套,用于大量種瓶培養(yǎng)基的**,一次能裝幾百至幾千瓶(袋)。(二)、培養(yǎng)基的分批**1、定義:將配制好的培養(yǎng)基輸入發(fā)酵罐中,用蒸汽加熱,使培養(yǎng)基和設備同時**的一種**方式,又稱實罐**。2、**過程過程包括升溫、保溫和冷卻等三個階段,各階段對**的貢獻:20%、75%、5%。培養(yǎng)基的升溫可由兩種方式實現(xiàn):間接加熱,在夾套或蛇管中通入蒸汽加熱;直接加熱,在培養(yǎng)基中直接通入熱蒸汽加熱。**過程中加熱和保溫階段的**作用是主要的,而冷卻階段的**作用是次要的,一般很小,可以忽略不計。此外,還應指出的是,應當避免長時間的加熱階段,因為加熱時間過長,不僅破壞營養(yǎng)物質,而且也有可能引起培養(yǎng)液中某些有害物質的生成,從而影響培養(yǎng)過程的順利進行。在實際生產中,也可能遇到所供蒸汽不足、溫度不夠高的情況,這時可以適當延長**時間。生產上甚至有用100℃蒸煮而達到徹底**的實例。如要做固體曲而沒有高溫蒸汽時,可將原料用100蒸汽蒸30min,殺死其中的營養(yǎng)細胞,但孢子與**的芽孢沒有被殺死。無酚紅培養(yǎng)基在實驗中減少了潛在毒性。海南MEM培養(yǎng)基價目表
C)大腸埃希菌++--產氣腸桿菌--++志賀菌屬-+--沙門菌屬-+-+表硫化氫和尿素酶試驗對腸桿菌屬的鑒別試驗傷寒沙門菌甲型副傷寒沙門菌變形桿菌志賀菌屬大腸埃希菌克雷伯菌屬硫化氫試驗-/+++++++---尿素酶試驗--+--+乳糖發(fā)酵試驗----++在培養(yǎng)基中加入指示劑或某種化學物質**不需要的**生長,利于需要的**分離,這種培養(yǎng)基稱為選擇性培養(yǎng)基。常用的抑菌劑有膽鹽、煌綠、玫瑰紅鈉、亞硒酸鈉等。常用的指示荊有溴甲酚紫、溴麝香草酚藍等。美藍是氧化還原指示劑。例如,在培養(yǎng)基內加入青霉素可**革蘭陽性**,而利于革蘭陰性**的生長;如果加入鏈霉素,則可獲得與加青霉素相反的選擇效果;加入制霉素可*****,有利于**的分離。又如亞**鉍瓊脂,既能**革蘭陽性**生長,又能**許多革蘭陰性**生長,但傷寒沙門菌卻能在這個培養(yǎng)基上生長出具有棕色環(huán)的菌落。SS瓊脂是臨床**檢驗中一種常用的選擇性培養(yǎng)基。大腸埃希菌在SS培養(yǎng)基上,因發(fā)酵乳糖而產酸,使指示劑中性紅變深,并使膽鹽沉淀,所以菌落紅色而不透明。沙門菌分解含硫氨基酸而產生硫化氫,硫化氫與枸櫞酸鐵形成硫化鐵,所以菌落中心呈黑色。痢疾志賀菌,既不發(fā)酵乳糖也不產生硫化氧。海南MEM培養(yǎng)基價目表MEM培養(yǎng)基在藥物篩選中有重要作用。
才能滿足新細胞合成、細胞代謝等生化反應所需要的物質和能量。細胞培養(yǎng)基的主要成份是水、氨基酸、維生素、碳水化合物、無機鹽和其它一些輔助營養(yǎng)物質等。此外,還可能含有血清、血清替代成分、pH指示劑等。水是細胞的主要成份,也是細胞賴以生存的主要環(huán)境。細胞培養(yǎng)液中90%以上的成份是水。細胞對水的品質非常敏感,水的品質將直接影響細胞培養(yǎng)的效果。而水中通常含有重金屬、氯、磷、有機物、熱原等污染物,細胞培養(yǎng)用水須經過純化,品質應符合***典注射用水標準或者超純水的標準。能源和碳源是用于維持細胞生命和支持細胞生長,主要包括糖、糖酵解的產物和谷氨酰胺,其他氨基酸是次要的能源和碳源物質。細胞能夠利用的糖類主要是六碳糖,目前大多體外培養(yǎng)時選取葡萄糖作為細胞的主要碳源和能量來源,因此細胞培養(yǎng)基中基本都含有葡萄糖,含量一般為5~25mmol/L。在葡萄糖濃度較高時,細胞主要通過擴散作用吸收葡萄糖,細胞膜內外的葡萄糖濃度梯度是細胞吸收葡萄糖的動力;在葡萄糖濃度較低時,主要由鈉離子推動的高親和性轉運過程使細胞攝取葡萄糖。葡萄糖進入細胞后參與糖酵解、核酸代謝、糖原合成、能量代謝以及一些氨基酸的合成。與體內的能量供應途徑不同。
所描述的實施例**是本申請一部分實施例,而不是全部的實施例?;诒旧暾堉械膶嵤├绢I域普通技術人員在沒有作出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例,都應當屬于本發(fā)明保護的范圍。實施例1一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基,其包括發(fā)酵培養(yǎng)基a和發(fā)酵培養(yǎng)基b;所述發(fā)酵培養(yǎng)基a首先添加,然后間隔24h添加發(fā)酵培養(yǎng)基b。所述發(fā)酵培養(yǎng)基a的制備方法為:取各原料:葡萄糖80g/l,酵母浸膏20g/l,k2hpo42g/l,mgso4·7h2o50mg/l,2-羥基乙胺40mg/l,cecl310mg/l,mnso4·h2o3mg/l,feso4·7h2o3mg/l,vb110mg/l,生物素7μg/l;將各原料攪拌均勻后,調節(jié)ph為,121℃**15min,自然冷卻,制得發(fā)酵培養(yǎng)基a;所述發(fā)酵培養(yǎng)基b的制備方法為:取各原料:琥珀酸5g/l,尿素2g/l,殼聚糖80mg/l;將各原料攪拌均勻后,調節(jié)ph為,121℃**15min,自然冷卻,制得發(fā)酵培養(yǎng)基b;采用常規(guī)發(fā)酵工藝:將黃色短桿菌gdk-9按8%接種量將種子液(od600nm為)接入裝有60l發(fā)酵培養(yǎng)基a的100l發(fā)酵罐中進行發(fā)酵培養(yǎng),發(fā)酵培養(yǎng)24h,然后添加10l發(fā)酵培養(yǎng)基b,繼續(xù)發(fā)酵培養(yǎng)24h,收集發(fā)酵液;整個發(fā)酵培養(yǎng)過程中,控制發(fā)酵溫度35℃,通風比1∶,攪拌轉速300r/min,溶氧維持在20%。MEM培養(yǎng)基適用于多種哺乳動物細胞。
Nutrientagar)培養(yǎng)基品牌:安捷倫型號:1260Lnifntiy參考報價:20萬-50萬培養(yǎng)基制備的基本方法和注意事項1.培養(yǎng)基配方的選定同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此,除所用的是標準方法,應嚴格按其規(guī)定進行配制外.一般均應盡量收集有關資料.加以比較核對.再依據(jù)自己的使用目的加以選用,記錄其來源。2.培養(yǎng)基的制備記品牌:安捷倫型號:1260Lnifntiy參考報價:20萬-50萬【分享】146種培養(yǎng)基的制備和大家一起分享bbs/images/品牌:安捷倫型號:1260Lnifntiy參考報價:20萬-50萬培養(yǎng)基制備的標準操作程序(SOP)名稱:培養(yǎng)基制備的標準操作程序(SOP)關鍵詞:培養(yǎng)基制備標準操作程序目的:如何使用成品培養(yǎng)基干粉制備各種合格的分離培養(yǎng)基。背景知識:選填項目原理:選填項目主體內容:操作步驟1.在玻璃容器中加入所需蒸餾水的二分之一量,品牌:安捷倫型號:1260Lnifntiy參考報價:20萬-50萬酵母培養(yǎng)基的制備一、目的要求了解合成培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基的配制原理。學習和掌握麥芽汁培養(yǎng)基、馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基、豆芽汁葡萄糖培養(yǎng)基和察氏培養(yǎng)基的配制方法。無血清培養(yǎng)基提供了無血清的純凈環(huán)境。海南MEM培養(yǎng)基價目表
F12培養(yǎng)基確保了實驗結果的一致性和可靠性。海南MEM培養(yǎng)基價目表
另外,酚紅作為pH值的指示劑被加入到細胞培養(yǎng)基中。酚紅在產物純化過程中會造成干擾,并且具有一定的固醇類***樣作用,如雌***樣作用。當用于哺乳類動物細胞的培養(yǎng),可能會發(fā)生一些固醇類反應?,F(xiàn)在商業(yè)化細胞培養(yǎng)基中的酚紅含量可根據(jù)需求調整。因生物反應器具有pH在線檢測技術,生物反應器培養(yǎng)動物細胞時,酚紅可完全去除。細胞保護劑是保護細胞免受滲透壓變化、剪切力、氧化及氣泡作用等引起的損傷的物質。在使用生物反應器培養(yǎng)動物細胞時,細胞易被機械攪拌和通氣鼓泡產生的流體剪切力和氣泡作用所傷害甚至破損死亡。為降低這種損傷,除優(yōu)化生物反應器結構和生產工藝外,可在細胞培養(yǎng)液中添加一些保護劑。其主要是通過改變細胞培養(yǎng)基物性或是對細胞具有保護作用的物質,常用的種類有血清、白蛋白、聚已二醇(PEG)、非離子性表面活性劑PluronicF68或是其他一些高分子聚合物等。3.細胞培養(yǎng)基的理化性質動物細胞在細胞培養(yǎng)基中不僅能存活,還要分裂增殖,合適的滲透壓、pH值等理化性質是細胞培養(yǎng)基必須具備的前提條件。動物細胞大多數(shù)需要輕微的堿性條件,適宜pH在~。細胞培養(yǎng)基的pH值通常需經校正的pH計來測定。在細胞生長過程中,隨細胞數(shù)量的增多和代謝活動的加強。海南MEM培養(yǎng)基價目表
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