蛋白質(zhì)晶體板

半胱氨酸、賴(lài)氨酸的蛋白質(zhì)、以及含有金屬離子的蛋白質(zhì)。這些蛋白質(zhì)的吸附會(huì)導(dǎo)致重組蛋白質(zhì)純度大幅降低。為了解決這一問(wèn)題，我們制備了兩類(lèi)新材料，用于提高重組蛋白質(zhì)純度:1)通過(guò)分子印跡技術(shù)，以組氨酸標(biāo)簽為模板，在IMAC材料表面形成組氨酸標(biāo)簽的分子印跡層，使得不含組氨酸標(biāo)簽的蛋白質(zhì)無(wú)法靠近IMAC材料，蛋白質(zhì)晶體培養(yǎng)板，從而提高重組蛋白純度;2)通過(guò)活性可控自由基聚合，在IMAC基質(zhì)材料表面包被了一層尺寸可控的聚合物涂層。在聚合物網(wǎng)絡(luò)的篩分作用下，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)帶組氨酸標(biāo)簽的重組蛋白的純化。

蛋白質(zhì)晶體板介紹使用

通過(guò)紅外光譜，掃描電鏡，X射線(xiàn)衍射對(duì)產(chǎn)物的晶型，形貌及物相進(jìn)行了詳細(xì)表征，初步探討了文石晶體形成機(jī)理及生長(zhǎng)機(jī)理。本文研究的主要內(nèi)容及所獲得的結(jié)論如下:1.常溫常壓下，以竹蟶韌帶纖維狀蛋白質(zhì)為基底，采用氣體擴(kuò)散法可以在較大的條件范圍內(nèi)合成出純文石晶體:即稀硫酸濃度0.1mol-L-1，NH4HCO3粉末19.0g，CaCl2濃度0.9-9.0mmol·L-1，溶液高度10-30mm，反應(yīng)溫度20-30℃，結(jié)晶時(shí)間3-12小時(shí)。而空白對(duì)照(以玻璃蓋玻片為基底)制備出的晶體主要為菱形方解石，還有少量文石和球文石。

蛋白質(zhì)結(jié)晶涉及四個(gè)重要步驟

1. 蛋白質(zhì)純度的確定。如果不夠非常純，必須要進(jìn)一步純化。

2. 蛋白質(zhì)溶解于合適的溶劑中，從中它能通過(guò)一種鹽或有機(jī)化合物而析出。溶劑通常是水-緩沖劑溶液，有時(shí)加，如2--2，蛋白質(zhì)晶體培養(yǎng)板報(bào)價(jià)，4-（MPD）。正常情況下，沉淀劑也被加入，但是濃度不高于使沉淀產(chǎn)生。對(duì)于不溶于水-緩沖劑或水-的膜蛋白，還需要加入去污劑。

3. 使溶液過(guò)飽和。在這一步中，小聚集體形成，它是晶體生長(zhǎng)所需的核。對(duì)小分子的結(jié)晶來(lái)說(shuō)，相比于蛋白質(zhì)更為人熟知，蛋白質(zhì)晶體培養(yǎng)板多少錢(qián)，晶核的自發(fā)形成需要提供表面張力能。一旦這個(gè)能障被突破了，晶體開(kāi)始生長(zhǎng)。能障在高水平的過(guò)飽和度時(shí)很容易克服。因此，在高過(guò)飽和度時(shí)，晶核更易自發(fā)形成。晶核的形成可作為一個(gè)過(guò)飽和度和其他參數(shù)的函數(shù)通過(guò)多種方法來(lái)研究，包括光散射、熒光去極化及電子顯微鏡。

4. 一旦晶核形成，晶體生長(zhǎng)正式開(kāi)始。對(duì)低分子量的化合物而言，新分子會(huì)逐步結(jié)合到正在生長(zhǎng)的晶體表面。這是由于這些位置的結(jié)合能比較大，相對(duì)于分子結(jié)合到平滑的表面。這些步驟要么由晶系缺陷造成，要么發(fā)生在表面隨機(jī)形成的晶核。

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