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蛋白質(zhì)晶體板技術(shù)研究
隨著人類基因組計(jì)劃的完成,近年來生物大分子的結(jié)構(gòu)與功能研究成為生命科學(xué)關(guān)注的熱點(diǎn).晶體學(xué)作為結(jié)構(gòu)生物學(xué)的基礎(chǔ),96-2孔板哪家好,培養(yǎng)出高質(zhì)量的單晶,對(duì)于蛋白質(zhì),核酸等生物大分子三維空間結(jié)構(gòu)的測(cè)定是至關(guān)重要的.文章分析和總結(jié)了蛋白質(zhì)結(jié)晶的原理,常用的結(jié)晶化方法以及促進(jìn)蛋白質(zhì)結(jié)晶化技術(shù)研究的新進(jìn)展,蛋白質(zhì)的分離純化的各種原理和方法作了簡(jiǎn)要的概述,96-2孔板公司,同時(shí)簡(jiǎn)單的介紹了蛋白質(zhì)結(jié)晶的方法及影響因素。
蛋白結(jié)晶板過程實(shí)驗(yàn)
蛋白結(jié)晶板過程是一種重要的分離過程單元操作,由于機(jī)理的復(fù)雜性以及動(dòng)態(tài)特性使得該過程的數(shù)學(xué)模型研究非常具有挑戰(zhàn)性.本文從間歇結(jié)晶過程建模和動(dòng)態(tài)模擬,動(dòng)態(tài)優(yōu)化,模型辨識(shí)以及魯棒優(yōu)化與控制等方面,介紹了間歇結(jié)晶過程數(shù)學(xué)模型的研究進(jìn)展,評(píng)述了其中的關(guān)鍵問題和求解技術(shù).指出對(duì)結(jié)晶過程的機(jī)理進(jìn)一步深入認(rèn)識(shí),開發(fā)數(shù)值穩(wěn)定,精度更高的求解算法是間歇結(jié)晶過程數(shù)學(xué)模型研究的基礎(chǔ).全局優(yōu)化效果較好的進(jìn)化算法和模型預(yù)測(cè)控制理論在結(jié)晶過程動(dòng)態(tài)優(yōu)化和質(zhì)量控制中的應(yīng)用是今后的研究方向。
新技術(shù)提升蛋白質(zhì)結(jié)晶成功率
超構(gòu)材料21世紀(jì)初被提出,截至目前它仍然是非?;钴S的前沿領(lǐng)域。其中的微結(jié)構(gòu),大小尺度與它作用的蛋白質(zhì)尺寸相當(dāng),因此得以對(duì)蛋白質(zhì)的結(jié)晶過程施加干預(yù),對(duì)蛋白質(zhì)的聚集態(tài)形成起到促進(jìn)作用,從而降低了兩步成核中的步能壘。其次,通過材料本體結(jié)構(gòu)的晶格對(duì)聚集態(tài)蛋白質(zhì)分子進(jìn)行引導(dǎo)排列,促進(jìn)蛋白質(zhì)分子的有序排列和晶核形成,從而降低了兩步成核中的第二步能壘。
盡管通過實(shí)驗(yàn)和理論證明了超構(gòu)材料在蛋白質(zhì)結(jié)晶方面的巨大潛力,但要充分發(fā)揮其優(yōu)勢(shì)則必須兼容當(dāng)前蛋白質(zhì)結(jié)晶通過的高通量篩選系統(tǒng)。目前國際上普遍采用液體處理機(jī)器人來進(jìn)行高通量結(jié)晶篩選,篩選一個(gè)結(jié)晶條件的蛋白樣品消耗體積為納升級(jí)別。因此,如何快速,穩(wěn)定地將成核劑添加到高通量系統(tǒng)的同時(shí),又不對(duì)結(jié)晶系統(tǒng)造成大的影響成為急需解決的問題。
隨后通過優(yōu)化生產(chǎn)和制備工藝,考察了各生產(chǎn)因素對(duì)成核劑尺寸和穩(wěn)定性的影響,確定了適合高通量蛋白質(zhì)結(jié)晶篩選的成核劑混懸劑的制備工藝流程。這是一種含有具有表面超結(jié)構(gòu)的有機(jī)無機(jī)復(fù)合材料,其尺寸分布在幾百納米到幾微米之間。該產(chǎn)品的組成為材料顆粒與水溶液的混懸液。在蛋白質(zhì)結(jié)晶篩選實(shí)驗(yàn)中,使用該產(chǎn)品有助于提高蛋白質(zhì)結(jié)晶篩選的成功率,包括改善晶體的分辨率和篩選新的結(jié)晶條件,使不結(jié)晶或難結(jié)晶的蛋白質(zhì)成功結(jié)晶,展現(xiàn)了巨大的應(yīng)用潛力,使用該成核劑已經(jīng)成功結(jié)晶和解析十多個(gè)蛋白質(zhì)晶體結(jié)構(gòu)。
此外,針對(duì)能夠結(jié)晶的蛋白質(zhì)分子,成核劑混懸液在篩選新的結(jié)晶條件,96-2孔板,提升結(jié)晶的分辨率方面同樣有效。目前,先進(jìn)院已經(jīng)與國內(nèi)超過18個(gè)實(shí)驗(yàn)室開展了合作,助力我國的生命科學(xué)和生物研究。
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