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蛋白結晶板
但主要是嗜熱菌蛋白酶的結晶條件數(shù)顯著減少,蛋白質(zhì)晶體培養(yǎng)板哪家好,其他4種蛋白在兩種方法上均有相近的結晶條件數(shù),表明微流控芯片能以接近24孔結晶板的效率進行蛋白質(zhì)結晶篩選.但是,在4℃時微流控芯片與24孔結晶板有60%的結晶條件不同,蛋白質(zhì)晶體培養(yǎng)板價格,20℃時有90%的結晶條件不同,這表明目前的這種微流控芯片還不能直接代替?zhèn)鹘y(tǒng)的24孔結晶板,蛋白質(zhì)晶體培養(yǎng)板多少錢,它可以作為蛋白質(zhì)結晶篩選時的一種補充方式。
技術成為目前迅速發(fā)展的前沿領域之一,是化學科學和生命科學分析研究的重要技術平臺.微流控技術高通量,低消耗和低成本的特點使其在蛋白質(zhì)結晶條件篩選和優(yōu)化方面展示了良好的應用前景.本文對應用于蛋白質(zhì)結晶的各種微流控芯片技術的原理和方法進行了綜述,并對目前幾種商業(yè)化和文獻報道的典型蛋白質(zhì)結晶微流控系統(tǒng)進行了介紹和比較.
蛋白結晶板
以蛋白質(zhì)晶體學為主要手段的結構基因組學研究通常包括選靶、、表達、純化、晶體篩選與優(yōu)化、X射線衍射數(shù)據(jù)收集與結構解析等步驟。其中,蛋白質(zhì)晶體培養(yǎng)板,獲得滿足衍射數(shù)據(jù)收集要求的高質(zhì)量蛋白晶體是大的"瓶頸"。我們在人類細胞內(nèi)氯離子通道蛋白2(CLIC2)結構與功能研究中發(fā)現(xiàn)用5,5"二硫雙-2-甲酸(處理,可以顯著提高CLIC2晶體質(zhì)量,成功收集了分辨率至2埃的衍射數(shù)據(jù)試劑作為一個檢測巰基化合物的經(jīng)典試劑,通常用在半胱氨酸或含量測定上。在蛋白晶體學領域里以獲得蛋白晶體為目的的試劑修飾例子實際并不多。我們將其應用在蛋白結晶學領域,使用Ellman試劑修飾方法使蛋白晶體質(zhì)量得到有效改善。
蛋白質(zhì)晶體板介紹
研究蛋白質(zhì)晶體結構的物理化學分支學科。蛋白質(zhì)分子是由上百或更多的α-氨基酸作為單體縮合而成的多肽(見肽)鏈構成的。能構成蛋白質(zhì)中多肽鏈的α-氨基酸總共有 20種L-氨基酸。通過它們不同的組合和排列形成氨基酸順序不同的多肽鏈,然后這些多肽鏈進一步通過交聯(lián)構成千萬種蛋白質(zhì)分子。多肽鏈的氨基酸順序及其交聯(lián)的位置代表蛋白質(zhì)分子的一級結構。在一級結構的基礎上,蛋白質(zhì)分子中的多肽鏈按一定的方式在空間分布,形成二級和三級立體結構等。-氨基酸、 多肽鏈和二硫橋蛋白質(zhì)分子是一個由α-氨基酸單體相互縮合而成的多肽分子。其中每個氨基酸縮合后殘留的部分稱為氨基酸殘基。
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