蛋白結(jié)晶板

蛋白質(zhì)分子的三維結(jié)構(gòu)是生命科學(xué)研究中極為重要的信息，X射線單晶衍射技術(shù)是目前獲得結(jié)構(gòu)信息的手段，但如何篩選到個(gè)蛋白晶體是該技術(shù)必需的步，也是制約結(jié)構(gòu)生物學(xué)發(fā)展的主要瓶頸問(wèn)題之一.現(xiàn)在一般通過(guò)規(guī)模篩選的方法從眾多的溶液中篩選出可結(jié)晶的條件，但是工作量較大，效率也不高.回顧了近年來(lái)在提高結(jié)晶篩選效率方向取得的成就。

蛋白質(zhì)結(jié)晶方法

結(jié)晶方法(Crystallization Techniques)1.1.1 分批結(jié)晶(Batch Crystallization) 這是老的簡(jiǎn)單的結(jié)晶方法，其原理是同步地在蛋白質(zhì)溶液中加入沉淀劑，立即使溶液達(dá)到一個(gè)高過(guò)飽和狀態(tài)。幸運(yùn)的話，不需進(jìn)一步處理即可在過(guò)飽和溶液中逐漸長(zhǎng)出晶體。一個(gè)用于微分批結(jié)晶的自動(dòng)化系統(tǒng)已被Chayen等人設(shè)計(jì)出（1991，1992），其微分批方法中，他們?cè)?-2μl包含蛋白質(zhì)和沉淀劑的液滴中生長(zhǎng)晶體。液滴被懸浮在油（如石蠟）中，油的作用是作為封層以防止蒸發(fā)，它并不干擾普通沉淀劑，蛋白質(zhì)結(jié)晶板價(jià)格，但是干擾能溶解油的(Chayen，蛋白質(zhì)結(jié)晶板公司， 1997; see also Chayen， 1998)。

蛋白結(jié)晶板使用

蛋白質(zhì)是水產(chǎn)品的主要組分，蛋白質(zhì)結(jié)晶板報(bào)價(jià)，其含量測(cè)定在水產(chǎn)品加工及研究等方面應(yīng)用極為廣泛.目前，各蛋白含量快速測(cè)定方法通常是在試管中進(jìn)行反應(yīng)并應(yīng)用分光光度計(jì)測(cè)定，其操作過(guò)程較繁瑣，分析大批量樣品時(shí)效率低，上述缺點(diǎn)在高通量篩選、檢測(cè)等場(chǎng)合尤為突出.為了克服該不足，實(shí)現(xiàn)蛋白含量的快速高通量測(cè)定，河北蛋白質(zhì)結(jié)晶板，本研究基于Folin-酚法，利用96孔板作為反應(yīng)器并配合比色，建立了一種蛋白含量測(cè)定的微孔板方法并評(píng)價(jià)其合理性.該法測(cè)得樣品的蛋白含量與常規(guī)法結(jié)果無(wú)顯著性差異，反應(yīng)在30-90 min顯色穩(wěn)定，標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性相關(guān)系數(shù)R2=0.9922，標(biāo)準(zhǔn)偏差范圍為0.07%-0.78%，檢測(cè)限為10 μg.與常規(guī)法相比，微孔板法保持了Folin-酚法的準(zhǔn)確性及穩(wěn)定性，同時(shí)具有通量高、節(jié)省樣品、試劑及測(cè)定時(shí)間等優(yōu)點(diǎn)，在蛋白高通量快速測(cè)定方面更具優(yōu)勢(shì)。

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