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三羥甲基氨基甲烷標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn),其中:(1)水溶解試驗(yàn):稱(chēng)取1g試樣,加10mL水,搖勻溶解。溶液應(yīng)澄清透明。(2)灼燒殘?jiān)鼨z驗(yàn):稱(chēng)取5g試樣,置于已恒重的坩堝中,慢慢加熱碳化,冷卻,新鄉(xiāng)氨丁三醇生產(chǎn)商,加0.5mL硫 酸,高純度氨丁三醇生產(chǎn)商,繼續(xù)加熱至硫酸蒸汽逸盡,在高溫爐中于650±50℃灼燒至恒重。殘?jiān)?質(zhì)量不得大于1.0mg。(4)用抽濾方法將結(jié)晶分離后,用無(wú)水乙醇淋洗2遍,于50℃干燥4小 時(shí),即得成品TRIS 680g,產(chǎn)品純度100.03%。
照薄層色譜分析實(shí)驗(yàn),汲取以上4種溶液各10μ1,各自點(diǎn)于在乙醇中預(yù)進(jìn)行的同一硅橡膠C薄層板上(如Merck薄層板或與之等效電路的薄層板),堿性氨丁三醇生產(chǎn)商,以-等保(1:9)為展開(kāi)劑,進(jìn)行后,在104C干躁后,噴以高溶液顯色液(取高溶液0.5G,加20g/L的碳酸鉀溶液100ml使融解)顯色,現(xiàn)貨氨丁三醇生產(chǎn)商,置放約十分鐘后檢驗(yàn),供試品溶液(1)如顯殘?jiān)诎?,與對(duì)比溶液所顯的主黑斑較為,不可更加深入。干躁失重狀態(tài)取三羥甲基羥基甲烷,在80C緩解壓力干躁至恒重,誠(chéng)失凈重不可過(guò)0.6%。熾灼殘?jiān)∪u甲基羥基甲烷1.0g,依規(guī)查驗(yàn),遺留下殘?jiān)豢蛇^(guò)0.1%。
Tris-HCl緩沖液優(yōu)點(diǎn)堿性較強(qiáng),可以只用這一種緩沖液配置由酸到堿的范圍pH緩沖液;對(duì)生物化學(xué)過(guò)程干擾很小,不與鈣、鎂離子及重金屬離子發(fā)生沉淀。Tris-HCl緩沖液缺點(diǎn)pH受濃度影響較大,稀釋10倍,pH變化大于0.1溫度效應(yīng)大,除了Tris-HCl之外,tris還有多種衍生緩沖液:TBS=Tris-HCl NaCl KCl,常用于清洗染色的組織或Western Blotting中的蛋白印跡膜等;TBST=Tris-HCl NaCl tween20,做Western Blotting中常用的一種洗膜緩沖液;TE=Tris-HCl EDTA,對(duì)DNA的堿基有保護(hù)性,常被用于DNA的穩(wěn)定和儲(chǔ)存;TAE=Tris base 乙酸 EDTA,是大片段DNA短時(shí)間電泳時(shí)廣泛使用的緩沖系統(tǒng);TBE=Trisbase 硼酸 EDTA,適用于長(zhǎng)時(shí)間DNA電泳,對(duì)較小片段分離效果較好。
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