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蛋白結晶板使用
用于人工和高通量蛋白晶體生長以及其他生物或有機晶體生長的設備和方法.一微孔板包含多個單元格,蛋白質結晶板哪家好,以及一限定微孔板中單元格的邊框.在每個單元格中至少存在一個上部開口的孔.單元格中的每個孔底部可以封閉,或者其底部是開口的,但孔底部由一獨立部件封閉,蛋白質結晶板公司,其可以為獨立的膜或板(例如塑料,玻璃或金屬)或一模制部件。
獲得晶體及提高晶體質量是蛋白質結晶方法學中的兩大基本問題.為解決這兩個問題,結構生物學家已發(fā)展了許多方法,其中針對蛋白質本身進行分子改造是非常重要的方法之一.通過蛋白質工程技術,如突變,還原化修飾,剪切或刪除構象柔性環(huán)區(qū),融合蛋白,復合物共結晶,原位蛋白質水解等方法對蛋白質本身進行分子改造。
普通蛋白結晶板
在普通24孔板的基礎上發(fā)展出來用于結晶學研究。透明的PS材料,平整無變形的底提供了優(yōu)異的光學性能??拙壨怀鲇诎迕妫瑴p少孔間污染的風險。在“沉滴”(Sitting Drop)中,需要用到“微橋”(Micro-Bridges),結晶過程中或之后,“微橋”可以轉移到另外一個孔??捎肰IEWseal?(676070)密封,也可以用蓋玻片通過硅油密封每一孔。
用于油下結晶(Microbatch),梯形的孔形可將樣品溶液集中于孔*,蛋白質結晶板,平的底部可在顯微鏡下觀察結晶的生長。
蛋白質結晶方法
液-液擴散(Liquid–Liquid Diffusion) 這種方法中,蛋白質溶液和含有沉淀劑的溶液是彼此分層在一個有小孔的毛細管中,一個測熔點用的毛細管一般即可(如圖1.2)。下層是密度大的溶液,例如銨或PEG溶液。如果如MPD被用作沉淀劑,它會在上層。以1:1混合,沉淀劑的濃度應該是所期終濃度的二倍。兩種溶液(各自約5μl)通過針頭導入毛細管,先導入下層的。通過一個簡易的搖擺式離心機去除氣泡。再加入上層,進而兩層之間形成一個明顯的界面,它們會逐漸彼此擴散。 Garc′?a-Ruiz and Moreno(1994)已經(jīng)發(fā)展液-液擴散技術至法。蛋白質溶液通過毛細力被吸入狹窄的管中,管的一端是封閉的。接著,開放端入置于小容器的凝膠中,凝膠使得管豎直,蛋白質溶液與凝膠接觸。含有沉淀劑的溶液被倒在凝膠上,整個裝置被保存于封閉的盒子以防蒸發(fā)。沉淀劑通過凝膠和毛細管的擴散時間可以由毛細管插入凝膠的深度控制,從而蛋白質溶液中即可形成過飽和區(qū)域,毛細管底部高而頂部低。這也可作為一個篩選佳結晶條件的額外信息。
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