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T細(xì)胞的ELISpot分析應(yīng)用:
ELISpot是研究特異性免疫反應(yīng)的敏感方法,能夠區(qū)分活化的T細(xì)胞亞群。例如,Th1細(xì)胞產(chǎn)生干擾素-γ、IL-2和TNF-α,而Th2細(xì)胞產(chǎn)生其他細(xì)胞因子,如IL-4、IL-5和IL-13。例如,這被廣泛應(yīng)用于infectious disease、cancer、過敏和自身免疫性疾病的研究。
在vaccine研究中,ELISpot是一種標(biāo)準(zhǔn)工具,用于通過測(cè)量激發(fā)強(qiáng)大T細(xì)胞反應(yīng)的能力(通常是干擾素-γ的分泌)來確定vaccine的有效性?;贓LISpot的診斷分析已經(jīng)可用,包括一種通過測(cè)量T細(xì)胞對(duì)tuberculosis分枝Bacillus特定抗原的反應(yīng)分泌干擾素-γ來檢測(cè)tuberculosis病感染患者的測(cè)試。
BIOREADER 5000 E γ實(shí)驗(yàn)步驟與原理示意 (示意圖如下)
大致原理上分為如下7個(gè)步驟,詳情已具體產(chǎn)品說明書為準(zhǔn)
Step.1 包被:將單clone捕獲Antibody添加到乙醇處理的PVDF膜板上
Step.2 細(xì)胞孵育:在有刺激的情況下加入細(xì)胞,孵育,細(xì)胞分泌細(xì)胞因子
Step.3 捕獲分泌物:activation后的細(xì)胞,BIOREADER 5000 E γ哪家好,分泌的細(xì)胞因子被周圍的Antibody結(jié)合捕獲
Step.4 檢測(cè)Antibody:去除細(xì)胞,清洗平板,BIOREADER 5000 E γ,加入生物素化的檢測(cè)Antibody
Step.5 鏈霉親和素-酶偶聯(lián)物:加入鏈霉親和素偶聯(lián)物,保證后續(xù)在膜上形成斑點(diǎn)
Step.6 加反應(yīng)底物:當(dāng)酶催化時(shí),BIOREADER 5000 E γ多少錢,顯色底物形成不溶性沉淀
Step.7 結(jié)果分析:在自動(dòng)點(diǎn)閱讀器中對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析。每個(gè)斑點(diǎn)對(duì)應(yīng)一個(gè)分析物分泌細(xì)胞
全自動(dòng)酶聯(lián)斑點(diǎn)分析儀
德國(guó)biosys bioreader 7000系列—酶聯(lián)斑點(diǎn)、熒光斑點(diǎn)、病毒斑 、克龍形成、種瘤細(xì)胞集落形成、趕細(xì)胞集落形成試驗(yàn)等分析金標(biāo)準(zhǔn)
酶聯(lián)免一斑點(diǎn)分析儀可用于酶聯(lián)免衣斑點(diǎn)實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析,以及病毒斑、菌落、克籠斑等微生物斑點(diǎn)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析??梢詫蝹€(gè)細(xì)胞的分泌可視化。如通過IFN-r,白細(xì)胞介素,腫六壞死因子等,BIOREADER 5000 E γ價(jià)格,分析抗原特異性T淋巴細(xì)胞的反應(yīng)性;也可以檢測(cè)B淋巴細(xì)胞分泌抗題的情況,實(shí)現(xiàn)對(duì)T、B淋巴細(xì)胞功能的研究。顯著的優(yōu)勢(shì)是高靈敏度,因?yàn)榧?xì)胞的分泌在其周圍被直接捕獲防止了被稀釋、漿解及被周邊細(xì)胞的受體結(jié)合的影響。酶聯(lián)免yi斑點(diǎn)實(shí)驗(yàn)方法敏感性、特異性和可重復(fù)性都很高,操作簡(jiǎn)單迅速,需要少量標(biāo)本,在檢測(cè)抗原特異性細(xì)胞數(shù)量的同時(shí)也反應(yīng)其功能,并與臨床結(jié)果相關(guān)。
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