酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù)（Enzyme linked Immunospot Assay，簡稱ELISPOT）

是細(xì)胞免疫學(xué)研究中更敏感的檢測方法，可以在單細(xì)胞水平對Antibody分泌細(xì)胞(ASC)及細(xì)胞因子(CK)分泌細(xì)胞進(jìn)行檢測，比ELISA和有限稀釋法等具有更髙的靈敏性，能從20萬-30萬細(xì)胞中檢岀1個(gè)分泌該蛋白的細(xì)胞。并且該方法能夠?qū)乖碳ず蟮腖iving cells進(jìn)行功能性檢測，具有較髙的特異性、直觀可信度髙，并且易操作，已被廣泛用于分泌CK細(xì)胞檢測或ASC測定中，在國內(nèi)外免疫學(xué)界獲得了廣泛的應(yīng)用。

ELISPOT實(shí)驗(yàn)步驟

淋巴細(xì)胞受到抗原刺激后局部產(chǎn)生細(xì)胞因子，此細(xì)胞因子被ELISPOT板底PVDF膜上(預(yù)包被的)的特異性單抗捕獲。去除細(xì)胞后，BEI捕獲的細(xì)胞因子與生物素標(biāo)記的單抗結(jié)合，其后再與堿性磷酸酶或辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素結(jié)合。加底物顯色后，PVDF膜上出現(xiàn)紫色或紅褐色的斑點(diǎn)表明細(xì)胞產(chǎn)生了細(xì)胞因子，通過酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)分析儀（ELISPOT Reader）對斑點(diǎn)的進(jìn)行自動計(jì)數(shù)和分析。

德國BIOSYS酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)檢測

德國BIOSYS酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)檢測

該EliSpot Reader是針對35-100mm培養(yǎng)碟、載片、6-384孔多孔板和微量培養(yǎng)板的自動檢測和分析儀器。適用于目前實(shí)驗(yàn)室常用的各種專YONG培養(yǎng)板上酶聯(lián)斑點(diǎn)(Elispot)、病毒斑（ Viral Plaque）、KE隆形成（CFU）、腫LIU細(xì)胞集落形成（HTCFA），酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)檢測，干XI胞集落形成試驗(yàn)等實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析。

專注于 EliSpot酶聯(lián)免YI斑點(diǎn)計(jì)數(shù)和定量自動化檢測分析設(shè)備30多年，biosys公司的專LI立體3D雙光照明（增強(qiáng)斑點(diǎn)與背景的對比度，有效抑制板孔側(cè)壁反光造成的“幻影現(xiàn)象”，提高檢測精QUE度），唯YI能進(jìn)行單斑點(diǎn)、每孔光密度測定以定量細(xì)胞YIN子分泌的照明系統(tǒng)，解決了ELISPOT斑點(diǎn)計(jì)數(shù)的快速化，標(biāo)準(zhǔn)化和斑點(diǎn)信息的詳細(xì)化，并且可以對細(xì)胞YIN子進(jìn)行定量分析，是唯YI能進(jìn)行單斑點(diǎn)、每孔光密度測定以定量細(xì)胞YIN子分泌的照明系統(tǒng)，獲得應(yīng)用于ELISPOT斑點(diǎn)識別的3D雙光源技術(shù)，首CI實(shí)現(xiàn)對ELISPOT膜板和ELISPOT透明板的良好識別，第YI個(gè)采用改進(jìn)機(jī)械結(jié)構(gòu)的前置式載物臺和自動開關(guān)密閉檢測室，同一孔中同時(shí)識別多至12色ELISPOT斑點(diǎn)，酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)檢測價(jià)格，首CI實(shí)現(xiàn)熒光ELISPOT檢測，歐盟科技項(xiàng)目：Eureka Project 2956（多種細(xì)胞YIN子分析儀）指DING儀器。

biosys的bioreader（ZUI新版本bioreader 7000系列）和 biocount（biocount6000系列）已成為Elispot酶聯(lián)免YI斑點(diǎn)檢測分析的金標(biāo)準(zhǔn)。

03酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)檢測免疫學(xué)基礎(chǔ)研究

根據(jù)檢測的細(xì)胞因子的不同，ELISPOT可以用來區(qū)分被activation的不同的T細(xì)胞亞群。例如Th1細(xì)胞主要分泌IFN-γ，IL-2和TNF-α，而其他一些細(xì)胞因子如IL-4，IL-5和IL-13一般是由Th2細(xì)胞分泌的。在過敏研究中的一個(gè)熱點(diǎn)就是采用ELISPOT測定Th2型細(xì)胞因子，酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)檢測多少錢，因?yàn)門h2反應(yīng)是過敏的主要反應(yīng)，酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)檢測生產(chǎn)廠家，但通常都是低頻率岀現(xiàn)，需要高度靈敏方法才能被成功檢測到。

04過敏研究

在針對特異反應(yīng)性過敏的免疫treat中監(jiān)測T細(xì)胞免疫反應(yīng)；在細(xì)胞介導(dǎo)的接觸過敏的體外檢測診斷的應(yīng)用中，ELISPOT方法受到越來越多過敏工作者的關(guān)注。因?yàn)閷τ谙馮h2型反應(yīng)主要細(xì)胞因子IL-4這樣的一貫很難通過其他方法如 flow cytometry和ELISA檢測到的因子來說，應(yīng)用高靈敏度的ELISPOT方法對于研究過敏原特異性免疫反應(yīng)顯得尤為重要。

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