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可調(diào)整基底剛度培養(yǎng)耗材技術(shù)歷史
早在1939,Glucksmann在體外培養(yǎng)細(xì)胞的力學(xué)加載研制方面,進(jìn)行了開拓性的研究。他將雞胚胎的脛骨內(nèi)膜細(xì)胞培養(yǎng)在成對(duì)的肋間肌基質(zhì)上,柔軟性基底24孔培養(yǎng)板多少錢,當(dāng)肌肉萎縮牽引肋骨相互靠近時(shí),離體培養(yǎng)的細(xì)胞即受到了壓力的作用。美國人Lee在1996年發(fā)明的靜態(tài)等雙軸牽張裝置,由于不用考慮細(xì)胞拉伸和壓縮的周期性效應(yīng),只能對(duì)細(xì)胞進(jìn)行靜態(tài)的拉伸應(yīng)力或壓縮應(yīng)力試驗(yàn)。經(jīng)過多年改進(jìn)和發(fā)展,已研制出多種體外培養(yǎng)細(xì)胞的力學(xué)加載。大致可以分為離心加載、流體加載、單細(xì)胞加載、壓力傳到加載和基地形變加載裝置。
1.用0.05%胰蛋白酶、胰蛋白酶-EDTA、0.05%細(xì)菌膠原酶或其他方法從基質(zhì)中釋放細(xì)胞。
2.向細(xì)胞中加入含的培養(yǎng)基以中和胰蛋白酶或膠原酶。
3.計(jì)算細(xì)胞數(shù)并確定所需細(xì)胞數(shù),柔軟性基底24孔培養(yǎng)板代理,6孔BioFlex的每個(gè)孔約1.2 X 105個(gè)細(xì)胞? 培養(yǎng)皿。注:細(xì)胞接種密度因細(xì)胞類型而異。我們建議測試細(xì)胞接種密度,以確定應(yīng)用程序的佳細(xì)胞數(shù)
細(xì)胞類型。
4.用培養(yǎng)基清洗細(xì)胞,柔軟性基底24孔培養(yǎng)板報(bào)價(jià),去除胰蛋白酶或膠原酶。
5.將細(xì)胞重新懸浮在所選培養(yǎng)基中,并將其播種到每個(gè)孔中。如果細(xì)胞會(huì)被拉伸,我們建議在每個(gè)孔中放置3毫升培養(yǎng)基,大約每48-72小時(shí)更換一次培養(yǎng)基,或者按照實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)準(zhǔn)組織培養(yǎng)方法。需要注意的是,只有附著的細(xì)胞才能承受均勻的應(yīng)變
當(dāng)膜處于完全拉伸位置時(shí),安裝到裝載柱上的膜區(qū)域。因此,
好用Flexcell細(xì)胞播種機(jī)將細(xì)胞接種到平板上? 設(shè)備,僅在均勻應(yīng)變區(qū)域內(nèi),或僅在均勻應(yīng)變區(qū)域內(nèi)查看或測試單元。要確定該面積,可使用以下方程式:
直徑=(裝載站直徑?) / (1 (大伸長率/100)),
式中,Max%extension是您計(jì)劃在您的療程中使用的大伸長率,Diameter是膜中心圓的直徑。此圓以外的任何單元格都不會(huì)接收到均勻的牽張。
可調(diào)整基底剛度培養(yǎng)耗材亮點(diǎn)
1)該系統(tǒng)對(duì)二維、三維細(xì)胞和組織各種培養(yǎng)物提供軸向和圓周應(yīng)力加載;不但具有雙軸向拉伸力加載,還具備單軸向加力功能
2)計(jì)算機(jī)控制的應(yīng)力加載系統(tǒng),為體外培育的細(xì)胞提供較的、可控制的、可重復(fù)的、靜態(tài)的或者周期性的應(yīng)力變化。
3)使用真空泵,抻拉培養(yǎng)板底部的彈性硅膠模,細(xì)胞培養(yǎng)板底部Z高伸展度可達(dá)到33%,通過氣體裝置可以自動(dòng)調(diào)節(jié)和控制應(yīng)力。
4)基于柔性膜基底變形、受力均勻;
5)可實(shí)時(shí)觀察細(xì)胞、組織在應(yīng)力作用下的反應(yīng);
6)獨(dú)具的flexstop隔離閥可使同一塊培養(yǎng)板力的一部分培養(yǎng)孔的細(xì)胞受力,一部分培養(yǎng)孔的細(xì)胞不受力,方便對(duì)比實(shí)驗(yàn);
7)與壓力傳導(dǎo)儀整合,同時(shí)兼?zhèn)涠嗤ǖ兰?xì)胞壓力加載功能;
8)與Flex Flow平行板流室配套,柔軟性基底24孔培養(yǎng)板,可在牽拉細(xì)胞的同時(shí)施加流體切應(yīng)力;
9)多達(dá)4通道,可4個(gè)不同程序同時(shí)運(yùn)行,進(jìn)行多個(gè)不同拉伸形變率對(duì)比實(shí)驗(yàn);
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