幾種酶的比較及限制酶

1幾種酶的比較

(1)限制性內(nèi)切酶:作用于DNA分子，切割磷酸二酯鍵，形成黏性末端或平末端。

(2) DNA連接酶:作用于DNA分子片段，連接磷酸二酯鍵，形成重組DNA分子。

(3) DNA聚合酶:作用于脫氧核苷酸，連接磷酸二酯鍵，形成新的DNA分子。

(4)解旋酶:作用于DNA分子，作用于氫鍵，形成DNA分子的單鏈。

2.限制酶:

(1)一種限制酶通常只識(shí)別一種特定的堿基序列，但是有少數(shù)限制酶卻可以識(shí)別不止

一種堿基序列。

(2)不同限制酶也可以識(shí)別同-堿基序列;

(3)不同限制酶識(shí)別的堿基序列雖然不同，但切出的末端也可能相互連接。

DNA部分片段的連接

　　DNA部分片段通過用每一種限制性內(nèi)切酶過量消化底物DNA而獲得。這些片段隨后用T4 DNA連接酶連接( 5′末端濃度為0.1-1.0 μM)。連接的片段然后用同一種限制性內(nèi)切酶重切。僅當(dāng)3′和 5′末端都保留完整，連接反應(yīng)才會(huì)發(fā)生;而且只有那些識(shí)別位點(diǎn)完全恢復(fù)的分子才能被重切。切割后正常的帶型說明3′和 5′末端都是完整的，而且準(zhǔn)備的酶樣品中檢測(cè)不到核酸外切酶和磷酸酶。

一般是以微生物屬名的第yi個(gè)字母和種名的前兩個(gè)字母組成，第四個(gè)字母表示菌株（品系）。例如，從Bacillus amylolique faciens H中提取的限制性內(nèi)切酶稱為Bam H，在同一品系細(xì)菌中得到的識(shí)別不同堿基順序的幾種不同特異性的酶，可以編成不同的號(hào)，如HindⅡ、HindⅢ，HpaI、HpaⅡ，MboI、MboⅡ等。

別名：restriction endonuclease簡(jiǎn)稱限制酶

酶反應(yīng)：限制性內(nèi)切酶能分裂DNA分子在一限定數(shù)目的專一部位上。它能識(shí)別外源DNA并將其降解。

單位定義：在指明pH與37℃，在0.05mL反應(yīng)混合物中，內(nèi)切酶，1小時(shí)消化1μg的λDNA的酶量為1單位。

性狀制品不含非專一的核酸水解酶（由10單位內(nèi)切酶與1μg λDNA，保溫16小時(shí)所得的凝膠電泳圖譜的穩(wěn)定性表示），這類酶主要是從原核生物中分離出來的，迄今已經(jīng)從近300多種不同的微生物中分離出約4000種限制酶。

內(nèi)切酶-友名生物公司由武漢友名生物技術(shù)有限公司提供。武漢友名生物技術(shù)有限公司位于湖北武漢市洪山區(qū)野芷湖西路16號(hào)創(chuàng)意天地辦公04棟701。在市場(chǎng)經(jīng)濟(jì)的浪潮中拼博和發(fā)展，目前友名生物在其它中享有良好的聲譽(yù)。友名生物取得全網(wǎng)商盟認(rèn)證，標(biāo)志著我們的服務(wù)和管理水平達(dá)到了一個(gè)新的高度。友名生物全體員工愿與各界有識(shí)之士共同發(fā)展，共創(chuàng)美好未來。