當(dāng)DNA聚合酶 III沿著滯后鏈模板移動(dòng)時(shí)，由特異的引發(fā)酶催化合成的RNA引物即可以由DNA聚合酶 III所延伸，合成DNA。當(dāng)合成的DNA鏈到達(dá)前一次合成的岡崎片段的位置時(shí)，滯后鏈模板及剛合成的岡崎片段從DNA聚合酶 III上釋放出來。由于copy叉繼續(xù)向前運(yùn)動(dòng)，RNA酶A，便又產(chǎn)生了一段單鏈的滯后鏈模板，它重新環(huán)繞DNA聚合酶 III，通過DNA聚合酶III開始合成新的滯后鏈岡崎片段。通過這種機(jī)制，前導(dǎo)鏈的合成不會(huì)超過滯后鏈太多，這樣引發(fā)體在DNA鏈上和DNA聚合酶 III以同一速度移動(dòng)。在copy叉附近，形成了以DNA聚合酶 III二聚體、引發(fā)體和解旋酶構(gòu)成的類似核糖體大小的以物理方式結(jié)合成的復(fù)合體，稱為DNA copy體。copy體在DNA前導(dǎo)鏈模板和滯后鏈模板上移動(dòng)時(shí)便合成了連續(xù)的DNA前導(dǎo)鏈，以及由許多岡崎片段組成的滯后鏈。當(dāng)岡崎片段形成后，DNA聚合酶I通過其 5"→3"外切酶活性切除岡崎片段上的RNA引物，并利用后一個(gè)岡崎片段作為引物由 5"→3"合成DNA填補(bǔ)缺口。zui后由DNA連接酶將岡崎片段連接起來，形成完整的DNA滯后鏈。

DNA連接酶的性質(zhì)

噬菌體T4DNA連接酶分子也是一條多肽鏈，分子量為60Ku，其活性很容易被0.2mol/L的KCl和精胺所抑制。此酶的催化過程需要ATP輔助。T4DNA連接酶可連接DNA-DNA，DNA-RNA，RNA-RNA和雙鏈DNA粘性末端或平頭末端。另外，NH4C1可以提高在大腸桿1菌DNA連接酶的的催化速率，而對(duì)T4DNA連接酶則無效。無論是T4DNA連接酶，還是大腸桿1菌DNA連接酶都不能催化兩條游離的DNA鏈相連接。

基因的分子手術(shù)是相當(dāng)復(fù)雜的過程，其中zui重要的是連接酶

互補(bǔ)堿基之間的配對(duì)，形成雙鏈。并在DNA連接酶的作用下，使同一DNA分子的兩端連接成環(huán)狀，或使兩個(gè)分子連成一大的線狀分子。不同限制性內(nèi)切酶切割DNA產(chǎn)生的三種不同類型的末端。

基因的分子手術(shù)是相當(dāng)復(fù)雜的過程，除了需要限制性內(nèi)切酶外，還需要其他- -些工具酶包括連接酶、DNA 聚合酶、RNA聚合酶、核酸酶、末端修飾酶等，對(duì)DNA或RNA進(jìn)行各種各樣的修飾。其中zui重要的是連接酶。

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