熒光標記技術是指運用熒光染料與待研究對象結合，利用它的熒光特性，提供待研究對象相關信息。熒光標記具有操作簡便、高穩(wěn)定性、高靈敏度等優(yōu)勢，使熒光染料在生命科學研究中應用，包括：標記活細胞或固定細胞中的蛋白質、多肽；作為功能性指示劑表征細胞健康狀況；設計各種熒光探針，尋找特定蛋白或藥物靶點。應用分類：多肽、蛋白、抗體標記：氨基標記、巰基標記、羧基標記；***成像：水溶性/脂溶性熒光染料、近紅外I區(qū)/II區(qū)熒光染料南京星葉生物科技有限公司提供不同用途的熒光染料，了解更多（包括但不限于）

Cy7 DiC18（DiR）是一個親脂性、近紅外熒光花青染料，這個染料常用于標記細胞質膜。河北長沙熒光染料

如何選擇的染料？

考慮到熒光染料種類繁多，您如何為您的特定應用選擇使用哪種染料？以下是您需要考慮的一些因素?！c實驗設計的兼容性：雖然它們可能與其他熒光團共享一些光譜相似性，但每種染料都是***的，并且具有不同的功能、激發(fā)和發(fā)射波長、波段形狀和寬度以及光穩(wěn)定性。為確保成功，請選擇與您的實驗設計相輔相成的一種。與設備的兼容性：選擇與您正在使用的照明源相匹配的染料。在選擇合適的熒光儀器時，請考慮儀器的靈敏度、動態(tài)范圍、穩(wěn)定性和通量、信噪比和信空白比。為了獲得更好的結果，請確保染料的發(fā)射曲線與可用的檢測方法相匹配。與樣品中其他熒光材料的相容性：在雙重或三重標記實驗中，您選擇的染料的發(fā)射和激發(fā)曲線不應與其他熒光團重疊。由于許多天然存在的細胞成分會以與您選擇的染料或探針相同的波長發(fā)出熒光，因此您還需要確?？梢詮谋尘白园l(fā)熒光中清楚地識別所選染料產生的信號。 河北長沙熒光染料D-熒光素（D-Luciferin）是螢火熒光素酶底物，其量子效率為0.88，是Luminol的20倍。

羅丹明屬于呫噸族。與市場上的許多其他染料相比，羅丹明具有出色的光穩(wěn)定性以及許多光物理特性，使其非常適合用作激光染料、熒光探針和顏料。它們在聚合物納米粒子表面的表征、聚合物-生物偶聯(lián)物的檢測、活細胞的成像以及寡核苷酸在膠乳上的吸附分析等方面特別有用。羅丹明熒光染料的衍生物也用作：分子開關，病毒表面修飾，化學傳感器，硫醇。不同類型的染料通過它們各自的取代基（R1、R2、R3、R4和G）來區(qū)分。由于它們的差異，這些熒光染料在溶液中也表現出不同的光物理特性（例如不同的熒光壽命和發(fā)射比較大值）。氨基被剛性化的羅丹明染料無論溫度范圍如何都表現出高量子產率，而在每個氮處具有兩個烷基取代基的那些表現出活化的內部轉化，量子產率和熒光壽命隨溫度的變化而變化。羅丹明101和羅丹明B是一些**常用的羅丹明染料具有以下特點：--羧基傾向于在酸性溶液中質子化--染料轉化為兩性離子堿性溶液--兩性離子染料在極性較小的有機溶劑中變?yōu)闊o色內酯要將羅丹明用作熒光探針，必須對其進行修改。這可以通過(thexanthenemoiety)氨基、羧基苯基環(huán)或羧酸基團的修飾來實現。與TRITC一樣，羅丹明(NHS-rhodamine)的熒光特性為544nm（比較大吸收波長）和576nm（比較大發(fā)射）。

1.DiD，DiO，DiI，DiR和DiS細胞膜染色液制備（1）配置DMSO或EtOH儲存液：儲存液用DMSO或EtOH配置濃度1～5mM。注意：未使用的儲存液保存在-20°C，避免反復凍融。（2）工作液制備：用合適的緩沖液（如：無血清培養(yǎng)基，HBSS或PBS）稀釋儲存液，配制濃度為1～5μM的工作液。注意：工作液的**終濃度是根據不同細胞和實驗的經驗來配制?？梢詮耐扑]濃度的十倍以上尋找比較好條件。

2.懸浮細胞染色（1）懸浮細胞密度為1×106/mL加入到工作液中。（2）在37℃培養(yǎng)細胞2～20分鐘，不同的細胞比較好培養(yǎng)時間不同。（3）染色細胞試管在1000～1500轉離心5分鐘。（4）傾倒上清液，再次緩慢加入預溫37℃的培養(yǎng)液。（5）重復（3），（4）步驟兩次以上。 D-熒光素鉀鹽是熒光素酶的水溶性底物，存在于多種發(fā)光生物體中。

熒光染料在細胞實驗中具有廣泛的應用1、細胞膜標記：可以使用熒光染料標記細胞膜，以觀察和研究細胞膜的動態(tài)和結構變化。2、染色體和DNA標記：用熒光染料標記染色體或DNA，可以觀察和分析DNA復制、轉錄、修復等過程3、蛋白質標記：通過熒光染料標記蛋白質，可以研究蛋白質的相互作用、定位和運動等特性。4、細胞器標記：使用特定波長的熒光染料可以標記和可視化細胞中的線粒體、溶酶體等細胞器。5、神經科學應用：熒光染料在神經科學中也有廣泛應用，如標記神經元和突觸，觀察神經信號的傳遞等。6、基因表達分析：通過熒光染料標記基因表達產物，可以定量分析基因的表達水平和細胞中的分布情況。非磺化花青類染料- 該組中的一些染料包括 cy3、cy3.3、cy5、cy5.5、cy7 和 cy7.5。河北長沙熒光染料

吲哚菁綠在生物識別和藥物輸送方面也有廣泛的應用。河北長沙熒光染料

PI是一種可對DNA染色的細胞核染色試劑，它在嵌入雙鏈DNA后釋放紅色熒光。常用于細胞凋亡(apoptosis)或細胞壞死(necrosis)的檢測，常用于流式細胞儀分析。盡管PI不能通過活細胞膜，但卻能穿過破損的細胞膜而對核染色。PI經常被用來與Calcein,AM、Hoechst33258或Hoechst33342等一起使用，能同時對活細胞和死細胞染色。PI-DNA復合物的激發(fā)和發(fā)射波長分別為535nm和615nm。2.染色過程（1）將1/10培養(yǎng)基體積的PI染色液加入到細胞培養(yǎng)基中（也可以用1/10濃度的PI緩沖液代替培養(yǎng)基）。（2）在37℃培養(yǎng)細胞10～20分鐘。（3）用PBS或合適的緩沖液洗滌細胞兩次。（4）用535nm激發(fā)波長，615nm發(fā)射波長的濾光器的熒光顯微鏡觀察細胞。儲存條件：-20℃干燥避光保存，有效期一年。注意事項：PI對人體有刺激性，請注意適當防護。河北長沙熒光染料