鼠尾Ⅰ型膠原：材料與方法：1.主要材料、試劑和儀器鼠尾、鹽酸、等滲氯化鈉溶液、鈣液、磷液均購自上海晶純生化科技股份有限公司。日立高新TEMHT770(日本日立公司)；多功能粉末X射線衍射儀。2.酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原蛋白取大鼠尾巴洗凈，用75%的乙醇浸泡5min。將尾巴剪開，去掉皮毛，并剪成小段，抽出銀色的肌腱。將肌鍵剪斷置于平皿中，用無菌等滲氯化鈉溶液浸泡。吸去等滲氯化鈉溶液，將肌鍵置于平皿中剪碎，按每克肌鍵50mL的比例加入0.1%的醋酸溶液。搖晃，將肌鍵分散于醋酸溶液中，4℃放置一周，然后以2186×g離心20min。在醋酸溶液的酸解下，肌腱水解成膠凍狀凝膠，置于冰箱4℃保存。鼠尾膠原醋酸溶解：在無菌條件下轉移上層的膠原溶液。蘇州鼠尾膠原廠家現貨

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項：三維膠原的制備鼠尾膠原蛋白型在濃度1mg/ml以上，pH左右時可形成具有一定強度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml。膠原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中，在成膠過程中需要加入0.06體積的0.1mol/LNaOH來中和。需要的溶液（均需要無菌、預冷）10mg/L酚紅用于pH指示）0.1mol/LNaOH，0.1mol/L乙酸(一般不用)，雙蒸水200ul鼠尾膠原蛋白型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中，加入690ulH2O12ul0.1mol/LNaOH12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中，會由于NaOH不能迅速混勻而產生局部的膠原凝結）立即混勻。再加入100ul10PBS10培養(yǎng)液，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后pH左右，如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅，初次使用時需要用pH試紙測試)。蘇州正規(guī)鼠尾膠原報價鼠尾膠原醋酸溶解：氯仿的量約為膠原溶液的10%。

簡介：鼠尾I型膠原蛋白（Collagenfromrattail,TypeI）系采用Birkedal-Hansen方法在無菌下制備，純度達到95%以上，可溶于0.006mol/L乙酸。本品可用于細胞培養(yǎng)皿的包被，特別適合普通細胞培養(yǎng)器皿不易貼壁細胞的培養(yǎng)；也可用于制備三維膠原凝膠，使細胞在模擬的三維環(huán)境中生長。質量標準：1、SDS-PAGE分析純度大于95%。2、無菌檢驗結果為陰性。3、本品2μg/cm2包被細胞培養(yǎng)皿后培養(yǎng)PC-12細胞，貼壁及生長正常。4、本品濃度1mg/mL，pH7.0時形成具有一定強度的三維膠原凝膠，NIH-3T3細胞在三維凝膠內生長正常、PC-12細胞在三維凝膠表面生長正常。

詳細步驟如下：1.75％酒精浸泡大鼠尾巴30min；2.將尾巴剪開、去掉皮毛，并剪成小段（3cm左右），抽出銀色的尾鍵；3.把剪碎的尾鍵置于150ml，0.1％消過毒的醋酸中，4℃放置，并不時振蕩；4.48h后取上清，4000轉離心30min后，取上清；5.分裝上清（鼠尾膠）4度（或-20度）保存。有時可繼續(xù)向4。中沉淀中加入10－20ml醋酸，重復以上步驟，以制備更多的鼠尾膠。在使用時，先將冰存的膠原液在室溫下解凍，再按以下步驟包被培養(yǎng)器皿：1）用吸管吸取膠原液，在無菌的培養(yǎng)器皿的生長面內壁上均勻地涂上薄薄的一層膠原溶液。2）若包被的是培養(yǎng)瓶，可向培養(yǎng)瓶通入氨氣或用浸有氨水的棉球封口片刻。讓氨氣充入瓶內后，即可旋緊瓶蓋或塞緊瓶塞。若為培養(yǎng)皿或板的話，可將培養(yǎng)皿或板放在已消毒的飯盒內，將浸有氨水的棉球放入飯盒內，蓋緊飯盒蓋，四周用封口膠封死。膠原蛋白降低了蛋白的免疫原性，提高了產率和生物相容性，降低了成本，適用于生物醫(yī)用材料。

一種生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法：1.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸溶液溶解沉淀物，成透明澄清黏稠溶液；在冰水浴中，調節(jié)pH=6.5，用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中，不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出，4°C沉淀10小時，去除上清液，去除上清液，絮狀溶液高速冷凍離心處理，收集沉淀；2.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸再次溶液溶解沉淀物，成透明澄清黏稠溶液，冰水浴中，調節(jié)PH=6.5;溶液依次通過陽離子交換樹脂、陰離子交換樹脂進行脫鹽處理；(8)將脫鹽后的膠原蛋白溶液，-40至-20°C預凍2?4小時，然后真空冷凍干燥，凍干產品經進一步處理得到含水率在3%以下的膠原蛋白微粉，滅菌、包裝，得到成品膠原蛋白粉末。制備鼠尾膠原：離心，4000轉/分，10-15分鐘。蘇州鼠尾膠原廠家現貨

利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養(yǎng)瓶內。蘇州鼠尾膠原廠家現貨

利用鼠尾Ⅰ型膠原構建與人類自體骨組織化學成分和分子結構相近的仿生骨材料。方法通過醋酸酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原蛋白，并重構成膠原纖維。然后，將重構后的膠原纖維放置在礦化液中模仿骨生物礦化2～6d，通過透射電子顯微鏡和電子衍射觀察骨生物礦化。結果酸解提取的鼠尾Ⅰ型膠原蛋白能夠重構成膠原纖維，并且具有特征性的D-Band結構。透射電子顯微鏡和電子衍射顯示：礦化2d后，羥基磷灰石鈣前體滲入膠原纖維，膠原纖維部分礦化；礦化6d后，膠原纖維內部完全礦化，形成Ⅰ型膠原蛋白/羥基磷灰石鈣的仿生骨材料。結論利用酸解法提取的鼠尾Ⅰ型膠原蛋白可以重構成膠原纖維，經礦化可形成與人類自體骨組織化學成分和分子結構一致的仿生骨材料。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄，并且制作簡便，成本低廉。蘇州鼠尾膠原廠家現貨