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4.**培養(yǎng)條件**:-培養(yǎng)基的制備方法包括稱取基礎(chǔ)培養(yǎng)基14.2g加入180ml蒸餾水,加熱溶解并不停攪拌;另取1.2g李斯特氏菌添加劑,加入20ml無菌水,并加入一些玻璃球,不停振動(dòng),使其乳化均勻,將二者分別于121℃高壓滅菌15分鐘。冷至50℃左右時(shí),把李斯特氏菌添加劑加入基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,并加入李斯特氏菌抑菌劑,混勻,傾入無菌平皿。5.**質(zhì)量控制**:-質(zhì)控菌株在37℃培養(yǎng)24-48小時(shí),單增李斯特氏菌和綿羊李斯特氏菌在該培養(yǎng)基上生長良好,形成藍(lán)色菌落,菌落周圍有一不透明環(huán)。其他菌如金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和沙門氏菌則不生長或生長不良。6.**儲(chǔ)存條件**:-制備好的固體平板保存于2-8℃,應(yīng)避免光線直接照射。干燥培養(yǎng)基應(yīng)放置于陰暗干燥處,保存溫度2-8℃。7.**注意事項(xiàng)**:-嚴(yán)格按照標(biāo)簽說明進(jìn)行配制培養(yǎng)基,避免混合時(shí)培養(yǎng)基和添加劑溫度過高導(dǎo)致平板出現(xiàn)絮狀物。干燥培養(yǎng)基超過保質(zhì)期、結(jié)塊和顏色變化都不能使用。這些特點(diǎn)使得李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基在食品衛(wèi)生微生物檢驗(yàn)中具有重要的應(yīng)用價(jià)值。亞硫酸鉍瓊脂平板培養(yǎng)皿主要用于沙門氏菌,特別是傷寒沙門氏菌的選擇性分離培養(yǎng) 。SB瓊脂
TCBS瓊脂培養(yǎng)皿是一種選擇性差異培養(yǎng)基,專門設(shè)計(jì)用于分離和鑒定腸道致病性弧菌,尤其是霍亂弧菌和副溶血性弧菌。這種培養(yǎng)基的名稱來源于其主要成分:硫代硫酸鈉(Thiosulfate)、檸檬酸鈉(Citrate)、膽汁鹽(Bile Salts)和蔗糖(Sucrose),這些成分共同作用以實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)菌種的選擇性生長和鑒別。成分與原理TCBS瓊脂培養(yǎng)皿的主要成分包括:酵母粉和蛋白胨:提供氮源、碳源、維生素和生長因子,支持細(xì)菌生長。氯化鈉:提供弧菌嗜鹽生長的比較好的環(huán)境,同時(shí)形成的高滲透壓抑制其他細(xì)菌生長。蔗糖:作為可發(fā)酵的碳源,用于檢測細(xì)菌的代謝活動(dòng)。膽酸鈉、牛膽粉、硫代硫酸鈉:與高pH值一起抑制革蘭氏陽性菌和大腸菌群的生長。檸檬酸鐵:與硫代硫酸鈉反應(yīng),作為檢測硫化氫產(chǎn)生的指示劑。溴麝香草酚蘭和麝香草酚蘭:作為pH指示劑,能夠根據(jù)細(xì)菌代謝產(chǎn)物改變顏色。瓊脂:作為凝固劑,使培養(yǎng)基凝固成固體狀態(tài)。3%賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基TSA+青霉素酶培養(yǎng)皿主要用于器皿、設(shè)備和表面的無菌檢測,特別適用于青霉素類物質(zhì)殘留的環(huán)境微生物監(jiān)測 。
改良亮綠瓊脂培養(yǎng)皿是一種在微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中使用的培養(yǎng)基,它通過提供細(xì)菌生長所需的營養(yǎng)和選擇性抑制某些細(xì)菌的生長,幫助實(shí)驗(yàn)者分離和培養(yǎng)目標(biāo)細(xì)菌。這種培養(yǎng)皿的主要成分包括瓊脂作為凝固劑,亮綠染料用于區(qū)分細(xì)菌生長區(qū)域,以及氨基酸、維生素和礦物質(zhì)等營養(yǎng)物質(zhì)。此外,根據(jù)需要,還可以添加抗生物質(zhì)以抑制特定細(xì)菌的生長。改良亮綠瓊脂培養(yǎng)皿具有易于觀察、穩(wěn)定性好等特點(diǎn),使得細(xì)菌生長區(qū)域更加明顯,便于觀察和計(jì)數(shù)。使用方法包括準(zhǔn)備培養(yǎng)皿、滅菌、接種、培養(yǎng)和觀察等步驟,同時(shí)需要注意保持無菌操作和根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇合適的抗生物質(zhì)。改良亮綠瓊脂培養(yǎng)皿在醫(yī)學(xué)、生物學(xué)、食品檢測等多個(gè)領(lǐng)域都有應(yīng)用,特別是在細(xì)菌的鑒定、分類和藥物敏感性測試方面具有重要價(jià)值。
除了Pachlewski固體培養(yǎng)基,常用的微生物培養(yǎng)基有多種,根據(jù)不同的分類標(biāo)準(zhǔn),可以列舉如下:1.**按成分分類**:-**天然培養(yǎng)基**:含有化學(xué)成分不完全明了的天然物質(zhì),如蛋白胨、牛肉膏等。-**合成培養(yǎng)基**:由已知化學(xué)成分的化學(xué)藥品配制而成,適用于科學(xué)研究。2.**按形態(tài)分類**:-**液體培養(yǎng)基**:不加任何凝固劑,適用于微生物的生理、代謝研究。-**半固體培養(yǎng)基**:加入少量凝固劑,用于觀察細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)等。-**固體培養(yǎng)基**:加入足量的凝固劑,常用于微生物的分離、純化。3.**按用途分類**:-**基礎(chǔ)培養(yǎng)基**:提供微生物生長繁殖所需的基本營養(yǎng)物質(zhì),如蛋白胨水、肉湯培養(yǎng)基。-**營養(yǎng)培養(yǎng)基**:在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加特殊營養(yǎng)物質(zhì),如葡萄糖、血液等。-**增菌培養(yǎng)基**:為液體培養(yǎng)基,用于細(xì)菌的增菌培養(yǎng)。-**選擇性培養(yǎng)基**:含有抑菌劑,有利于特定微生物的增殖或分離。-**鑒別培養(yǎng)基**:加入試劑或化學(xué)藥品,通過培養(yǎng)后的變化區(qū)別不同類型的微生物。制備SDA時(shí),需要按照一定的比例稱取各種成分,溶解在蒸餾水中,調(diào)節(jié)pH值,然后進(jìn)行高壓滅菌。
LPM瓊脂培養(yǎng)皿的優(yōu)點(diǎn)使用LPM瓊脂培養(yǎng)皿具有以下優(yōu)點(diǎn):高選擇性:LPM瓊脂培養(yǎng)皿中的特定成分能夠有效抑制非目標(biāo)細(xì)菌的生長,提高李斯特菌的分離效率。易于操作:制備和使用LPM瓊脂培養(yǎng)皿的過程相對(duì)簡單,便于實(shí)驗(yàn)室人員操作。穩(wěn)定性好:LPM瓊脂培養(yǎng)皿在適當(dāng)?shù)拇鎯?chǔ)條件下具有良好的穩(wěn)定性,便于長期保存。結(jié)果可靠:LPM瓊脂培養(yǎng)皿能夠提供可靠的檢測結(jié)果,有助于準(zhǔn)確診斷和評(píng)估李斯特菌的污染情況。適應(yīng)性強(qiáng):LPM瓊脂培養(yǎng)皿適用于多種樣本類型,包括食品、環(huán)境和臨床樣本。TBA培養(yǎng)基中添加的膽汁鹽是其選擇性培養(yǎng)特性的關(guān)鍵因素。膽汁鹽對(duì)革蘭氏陽性細(xì)菌具有抑制作用。艾默生YpSs瓊脂/酵母-淀粉瓊脂
含糖牛肉湯瓊脂培養(yǎng)皿主要成分包括牛肉浸粉、氯化鈉、胨、乳糖等,為細(xì)菌提供所需的碳源、氮源和維生素。SB瓊脂
腦心浸萃液態(tài)培養(yǎng)基(BrainHeartInfusionBroth,簡稱BHI)是一種使用的微生物培養(yǎng)基,其特點(diǎn)如下:1.**營養(yǎng)豐富**:BHI培養(yǎng)基含有牛腦浸粉和牛心浸粉,提供微生物生長所需的碳氮源、維生素和生長因子,適合培養(yǎng)各種細(xì)菌,包括營養(yǎng)要求較高的微生物。2.**成分**:典型的BHI培養(yǎng)基配方包含胰蛋白胨、牛腦浸出粉、牛心浸出粉、氯化鈉、葡萄糖和磷酸氫二鈉等成分,這些成分共同維持培養(yǎng)基的滲透壓和pH值,確保微生物的良好生長。3.**pH緩沖**:磷酸氫二鈉作為pH緩沖劑,幫助維持培養(yǎng)基的pH穩(wěn)定,通常pH值控制在7.4±0.2(25℃)。4.**應(yīng)用廣**:BHI培養(yǎng)基不僅用于細(xì)菌的培養(yǎng),還適用于霉菌、酵母等其他微生物的培養(yǎng)。它特別適用于礦泉水和城市供水中糞性鏈球菌濾膜法的確證性實(shí)驗(yàn)。5.**制備方法**:將BHI培養(yǎng)基的粉末溶解在蒸餾水中,加熱煮沸至完全溶解,通常在121℃下高壓滅菌15分鐘,然后備用。6.**質(zhì)量控制**:BHI培養(yǎng)基在質(zhì)控實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)出對(duì)多種菌株的良好支持,如糞腸球菌、屎腸球菌、金黃色葡萄球菌、化膿性鏈球菌和大腸埃希氏菌等,這些菌株在BHI培養(yǎng)基上能夠良好生長并表現(xiàn)出特定的生長特征。SB瓊脂
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