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武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);可以開展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。我們采用roche標(biāo)記及顯色試劑盒,GISH/ISH/FISH按照探針進(jìn)行收費(fèi),每個(gè)試劑盒每條探針可以雜交60-80張玻片,收費(fèi)為1萬(wàn)5千元,GISH雜交因需要加抗淬滅劑每條探針收費(fèi)為1萬(wàn)9千元。
熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization,F(xiàn)ISH)技術(shù)是在已有的性原位雜交技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種非性DNA分子原位雜交技術(shù)。核酸分子在pH〉10和pH〈3的環(huán)境中也會(huì)變性,當(dāng)條件適合時(shí)又可復(fù)性。它利用熒光標(biāo)記的核酸片段為探針,與染色體上或DNA顯微切片上的特異fl-N:~行雜交,通過(guò)熒光檢測(cè)系統(tǒng)(熒光顯微鏡)檢測(cè)信號(hào)DNA序列在染色體或DNA顯微切片上的目的DNA序列,進(jìn)而確定其雜交位點(diǎn)。FISH技術(shù)檢測(cè)時(shí)間短,檢測(cè)靈敏度高,無(wú)污染,已廣泛應(yīng)用于染色體的鑒定、基因定位和異常染色體檢測(cè)等領(lǐng)域。FISH是原位雜交技術(shù)大家族中的一員,因其所用探針被熒光物質(zhì)標(biāo)記(間接或直接)而得名,該方法在80年代末 被發(fā)明,現(xiàn)已從實(shí)驗(yàn)室逐步進(jìn)入臨床診斷領(lǐng)域。 基本原理是熒光標(biāo)記的核酸探針在變性后與已變性的靶核酸在退火 溫度下復(fù)性;通過(guò)熒光顯微鏡觀察熒光信號(hào)可在不改變被分析對(duì)象(即維持其原位)的前提下對(duì)靶核酸進(jìn)行分析。
武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);可以開展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。將這些菌落歸并到一個(gè)瓊脂主平板以及已置于第二個(gè)瓊脂平板表面的一張纖維素濾膜上。
探針的標(biāo)記物可以是性同位素,也可以是非性生物素和半抗原等,性同位素中,3H和35S為常用,3H標(biāo)記的探針半衰期長(zhǎng),成像分辨率高,便于定位,缺點(diǎn)是能量低,35S標(biāo)記探針活性較高,影像分辨率也較好,而32P能量過(guò)高,致使產(chǎn)生的影像模糊,不利于確定雜交位點(diǎn)。RNA原位核酸雜交又稱RNA原位雜交組織化學(xué)或RNA原位雜交。
武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);可以開展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。例如,對(duì)致密染色體DNA的原位雜交可用于顯示按規(guī)定序列的位置,對(duì)分裂期間核DNA的雜交可研究特定序列在染色質(zhì)內(nèi)的功能排布。原位雜交對(duì)照試驗(yàn)
同組織化學(xué)染色對(duì)照一樣,為證明原位雜交實(shí)驗(yàn)操作的準(zhǔn)確性和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的特異性,需要設(shè)置一系列對(duì)照實(shí)驗(yàn),具體的各種對(duì)照實(shí)驗(yàn)的設(shè)置及其意義請(qǐng)參考原位雜交專著,以下僅介紹幾種常用的對(duì)照實(shí)驗(yàn)。
武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);可以開展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。用Parafilm膜封好主平板,倒置貯放于4℃,直至獲得雜交反應(yīng)的結(jié)果裂解細(xì)菌,按本段下面所述方法,使釋放的DNA結(jié)合于纖維素濾膜。