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發(fā)布時間:2021-07-24 15:44  






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RPA技術(shù)主要依賴于三種酶:能結(jié)合單鏈核酸(寡核苷酸引物)的重組酶、單鏈 DNA結(jié)合蛋白(SSB)和鏈置換DNA聚合酶。這三種酶的混合物在常溫下也有活性,反應(yīng)溫度在37°C左右。


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一種基于CRISPRCas的常溫等溫快速檢測核糖核酸的技術(shù)及檢測方法.本發(fā)明旨在生物體外利用公開的多種基因工程酶與化學(xué)組分進行核糖核酸擴增,并通過一種或多種核酸酶,在常溫等溫條件下實現(xiàn)快速,一步或兩步的完成特定核糖核酸(RNA)或脫氧核糖核酸(DNA)的擴增與檢測過程,使對各種核酸的檢測更快速和更簡便.包括以下步驟:(1)通過核酸提取得到待檢測樣本的RNA或單鏈DNA或雙鏈DNA;(2)利用逆轉(zhuǎn)錄酶,轉(zhuǎn)錄酶,核糖核酸酶H,CRISPR相關(guān)蛋白13的組合酶以及核酸熒光探針與待檢核酸在等溫進行反應(yīng),若待檢測核酸為DNA,在反應(yīng)前增加預(yù)變性的步驟;(3)通過檢測熒光信號,判斷待檢測樣本中是否存在目標(biāo)核酸。



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