【廣告】
武漢思特進科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術公司;公司實驗中心有分子生物學平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。FISH的基本原理是將DNA(或RNA)探針用特殊的核苷酸分子標記,然后將探針直接雜交到染色體或DNA纖維切片上,再用與熒光素分子偶聯(lián)的單與探針分子特異性結(jié)合來檢測DNA序列在染色體或DNA纖維切片上的定性、定位、相對定量分析。
RNA原位核酸雜交又稱RNA原位雜交組織化學或RNA原位雜交。必要時,動物組織可進行灌流固定,然后將組織按要求取材放入20%蔗糖中,4℃過夜,次日可行冰凍切片。該技術是指運用cRNA或寡核苷酸等探針檢測細胞和組織內(nèi)RNA表達的一種原位雜交技術。其基本原理是:在細胞或組織結(jié)構(gòu)保持不變的條件下,用標記的已知的RNA核苷酸片段,按核酸雜交中堿基配對原則,與待測細胞或組織中相應的基因片段相結(jié)合(雜交),所形成的雜交體 (Hybrids)經(jīng)顯色反應后在光學顯微鏡或電子顯微鏡下觀察其細胞內(nèi)相應的mRNA、rRNA和tRNA分子。
武漢思特進科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術公司;公司實驗中心有分子生物學平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。對分散在若干個瓊脂平板上的少數(shù)菌落(100-200)進行篩選時,可采用該方法。
原位雜交技術因其高度的靈敏性和準確性而日益受到許多科研工作者的歡迎,并廣泛應用到基因定位、和基因圖譜的構(gòu)建等研究領域。將濾膜轉(zhuǎn)到盛有150ml預雜交液的玻璃中,在適宜溫度(即在水溶液中雜交時用68℃,而在50%甲酰胺中雜交時用42℃)下,預雜交1-2小時。目前原位雜交技術在植物中的應用比較廣泛,例如在棉花、麥類和樹木等的遺傳育種方面取得了顯著的成就,在畜牧上原位雜交技術主要用于基因定位和基因圖譜的構(gòu)建以及轉(zhuǎn)基因的檢測和等方面。
武漢思特進科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術公司;公司實驗中心有分子生物學平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。切片及細胞標本的制備載玻片的處理因為原位雜交一般在載玻片上進行,所以載玻片必須保持清潔且不能有任何核酸酶的污染。
在水產(chǎn)方面,原位雜交技術則主要應用于基因定位(多見于對魚類和貝類等水生物的研究)和病毒的檢測(多見于蝦類)。2.固定進行原位雜交的組織或細胞必須經(jīng)過固定處理,固定的目的是為了①保持細胞形態(tài)原有結(jié)構(gòu)。此外,原位雜交技術做為染色體高分辨顯帶技術的補充和發(fā)展,在水生物的細胞遺傳學的研究領域?qū)l(fā)揮更重要的作用。同其他的生物技術一樣,原位雜交技術在其發(fā)展與應用的過程中會出現(xiàn)一些問題,但隨著原位雜交技術的不斷改進與完善以及檢測手段的改進,原位雜交技術的優(yōu)越性越來越突出,其應用也會更加廣泛。
武漢思特進科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術公司;公司實驗中心有分子生物學平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。陽性對照用已知含靶序列的組織切片與待檢標本同樣處理,結(jié)果應為陽性,稱陽性對照。
mFISH是在熒光原位雜交基礎上發(fā)展起來的新技術,它不僅具有FISH的優(yōu)點,而且克服了FISH的許多局限,其特點是可將多次繁頊的FISH實驗和多種不同的基因定位在一次FISH實驗中完成。2)加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1毫升,60℃,放置30分鐘,重復一次。mFISH能同時檢測多個基因,分辨復雜的染色體易位和微小缺失,區(qū)分間期細胞多倍體和超二倍體等。mFISH用激發(fā)光譜和吸收光譜不同的熒光索按一定調(diào)色方法標記不同的探針,從而對不同靶DNA同時進行定位和分析,并能對不同探針在染色體上的位置進行排序。