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組織研磨儀的工作原理
我公司主營(yíng)各種研磨儀,粉碎儀,破碎儀,篩分儀等前處理設(shè)備,歡迎來(lái)電咨詢(xún)洽談合作。
ST-M200組織研磨儀是專(zhuān)業(yè)用于實(shí)驗(yàn)室少量、多種樣品快速制備的儀器。不僅適用于對(duì)硬性、中硬性、脆性,軟性、彈性、纖維質(zhì)材料的細(xì)粉碎和精細(xì)研磨,還適用于小量樣品,進(jìn)行快速干磨、濕磨或者冷凍研磨。此外,高通量組織研磨儀還特別適用于生物細(xì)胞破壁以及DNA/RNA的提取?!p少樣品揮發(fā)低溫研磨能顯著減少樣品的揮發(fā),更完整保留樣品成分含量·研磨韌性/硬性樣品對(duì)于高韌塑料、高強(qiáng)塑料、樹(shù)脂等難研磨樣品,低溫研磨可大大提高研磨效果及效率。以其優(yōu)越的性能和高超的靈活度而成為實(shí)驗(yàn)室的不可缺少的儀器。
工作原理:將樣品研磨球放入研磨容器內(nèi)(如研磨罐或離心管/適配器),在高頻擺動(dòng)作用下,研磨球在研磨容器內(nèi)來(lái)回高速撞擊及摩擦,在幾秒到幾分鐘內(nèi)輕松實(shí)現(xiàn)樣品的研磨、粉碎、混合及細(xì)胞破壁。
組織研磨儀采用垂直振蕩,使研磨管內(nèi)冷凍的樣品與研磨球型號(hào)碰撞,產(chǎn)生的剪切力和撞擊力使組織完全破碎。
組織研磨儀的使用方法如下:1.需將待測(cè)的樣品經(jīng)過(guò)簡(jiǎn)單切碎稱(chēng)重后,放入50ml離心管中。2.然后加入兩粒15mm研磨珠,在高通量組織研磨儀上以1000 r/min研磨3分鐘,即可得到初步的農(nóng)殘檢測(cè)樣品。3.再經(jīng)過(guò)提取液分離、鹽類(lèi)除水和吸附劑除雜之后,就可以得到清液,用于進(jìn)一步的檢測(cè)分析?;旌闲Ч梢酝ㄟ^(guò)使用多個(gè)不同直徑的小研磨球來(lái)得到進(jìn)一步的提高,高通量組織研磨機(jī)研磨時(shí)使用多個(gè)不同直徑的小研磨球可以大大提高樣品的均混度。
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以下內(nèi)容是由北京旭鑫盛科有限公司提供,希望對(duì)同行業(yè)有所幫助!
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每50~100mg 組織加入0.2體積 TRIzol
1.加鋼球1顆,設(shè)置研磨儀參數(shù):12單位振頻,1min,每種樣品基本充分勻漿
2. 將上述勻漿液每0.2體積 TRIzol 試劑用量的勻漿液中加入0.04體積氯方,蓋緊管蓋,手動(dòng)劇烈震搖15 秒鐘,然后室溫靜置2~3 分鐘。
3. 4℃ 10,000g 離心10 分鐘。
4. 小心吸取上層水相(無(wú)色)加入到新試管中,同時(shí)計(jì)算所吸取的水相體積。不必過(guò)多吸取,防止吸入DNA和蛋白雜質(zhì)(中間層,白色)。
5. 加入所吸取水相等體積預(yù)冷的異丙淳,蓋緊管蓋,輕輕搖勻。
6. 室溫靜置10 分鐘,待RNA 充分沉淀(為減少RNA 降解,此步驟可省略)。
7. 4℃ 10,000g 離心10 分鐘。
8. 將上清棄除(注意別丟棄沉淀),每管加入0.2體積75%乙醇潤(rùn)洗,蓋緊管蓋,輕輕晃動(dòng)試管,以去除殘留的異丙淳和鹽份。4℃ 7,500g 離心5 分鐘。
9. 將上清棄除(注意別丟棄沉淀),打開(kāi)管蓋,將RNA 沉淀干燥(室溫?fù)]發(fā)或真空干燥)。注意RNA 沉淀不可完全干燥,否則難以溶解。
10. 將RNA 沉淀溶解于適量的無(wú)RNase 水中。如果RNA 沉淀溶解不完全,將使OD260/OD280≤1.6。此RNA 溶液可用于進(jìn)一步實(shí)驗(yàn),或者-70℃保存。