動物模型的設(shè)計原則

可靠性

的動物模型來應該力求可靠地反映人類疾病，即可特異地、可靠地反映某種疾病或某種機能、代謝、結(jié)構(gòu)變化，應具備該種疾病的主要癥狀和體征，經(jīng)化驗或 X 照片、心電圖、病理切片等證實。若易自發(fā)地出現(xiàn)某些相應病變的動物，就不應加以選用，易產(chǎn)生與疾病相混淆的疾病者也不宜選用。例如鉛可用大白鼠做模型，但有缺點，因為它本身容易患動物地方性及進行性，后者容易鉛所致的相混淆，不易確定該是鉛所致還是它本身的疾病所致。用蒙古沙土鼠就比較容易確定，因為一般只有鉛才會使它出現(xiàn)相應的變。應用該法，可以待動物恢復健康后，在動物清醒狀態(tài)下反復采集胃液。

動物選擇

　　選擇好適合研究需要的實驗動物是獲得正確實驗結(jié)果和實驗成功的重要環(huán)節(jié)。應按照不同實驗的要求選擇合適的動物。如作的研究工作，就必須了解哪種動物是高癌種，哪種是低癌種，各種動物自發(fā)性的發(fā)生率是多少。如A系、C3H系、AKR系、津白Ⅱ等小鼠是高癌品系小鼠，C3H/He系經(jīng)產(chǎn)雌鼠有80～100%的自發(fā)性 。AKR系8～9月齡小鼠有80～90%自發(fā)性血病。C57BL系、津白Ⅰ等小鼠是低癌品系小鼠。不同動物對同一因素的反應雖然往往是相似的，但也常常會遇到動物出現(xiàn)特殊反應的情況。如5歲以上的雌狗常自發(fā)性，如果給雌狗孕，就更容易誘發(fā)。過程中一旦出現(xiàn)與人類疾病不同的情況，必須分析其分岐范圍和程度，找到相平行的共同點，正確評估哪些是有價值的。雌還容易引起狗發(fā)生 ，這在其它實驗動物是很少見的。怎樣選擇好實驗動物可參看實驗動物的選擇和應用一講。

實驗動物的選擇

小鼠

小鼠性情較溫順，一般不會咬人，比較容易抓取固定。通常用右手提起小鼠尾巴將其放在鼠籠蓋或其它粗糙表面上，在小鼠向前掙扎爬行時，用左手拇指和食指捏住其雙耳及頸部皮膚，將小鼠置于左手掌心、無名指和小指夾其背部皮膚和尾部，即可將小鼠固定。在一些特殊的實驗中，如進行尾靜脈注射時，可使用特殊的固定裝置進行固定,如尾靜脈注射架或粗的玻璃試管。如要進行手術(shù)或心臟采血應先ma醉再操作,如進行解剖實驗則必須先無痛處死后再進行。例如日本人找到的大白鼠原發(fā)性就是研究人類原發(fā)性的理想模型，老母豬自發(fā)性冠狀動脈粥樣硬化是研究人類的理想模型。

大鼠急性肝損傷模型

一． 主要試劑及耗材：

8周齡雄性SD大鼠

對乙酰氨基酚（阿拉丁，A105808）

血生化儀（HITACHI，7100）

PBS（南京生興生物，SN331）

二． 實驗方法：

正式實驗開始前，大鼠禁食12h，然后對乙酰氨基酚組（即模型組）給予450mg/kg的對乙酰氨基酚溶液(用40℃生理鹽水配制)灌胃，空白對照組則采用相等容量的生理鹽水灌胃。

空白對照組：大鼠毛發(fā)光滑，好動，食欲佳；對乙酰氨基酚組（即模型組）大鼠精神萎靡，活動欠佳，食欲減退。

肝組織損傷程度病理學分級標準：0度（-）：肝細胞、肝細胞索、肝竇均正常，未見肝細胞水腫或空泡的異常改變；1度（ ）：在一個肝小葉中，有1/3以內(nèi)肝細胞水腫，中央靜脈周圍的肝細胞核濃染成黑色固縮，分布散在；2度（ ）：在一個肝小葉中，有1/3～1/2以內(nèi)的肝細胞水腫，肝細胞明顯疏松化，中央靜脈周圍出現(xiàn)點狀壞死，分布較廣，匯管區(qū)有少量炎細胞浸潤；因此，設(shè)計動物疾病模型的一個重要原則是，所的模型應盡可能近似于人類疾病的情況。3度（ ）：在一個肝小葉中，有1/2以上的肝細胞水腫，肝細胞氣球樣變，匯管區(qū)出現(xiàn)炎細胞浸潤，點狀壞死灶。

空白對照組大鼠組織結(jié)構(gòu)正常，肝索呈狀排列整齊，胞漿著色均勻，細胞核清晰。對乙酰氨基酚組可見肝小葉中央實質(zhì)細胞碎片狀壞死，肝小葉結(jié)構(gòu)不清，和索排列紊亂，肝細胞水腫，胞漿內(nèi)空泡樣變性；(六)打孔或剪缺口法：可用打孔機在兔耳一定位置打一小孔來表示一定的號碼?？梢娦律渭毎?，核仁明顯，少數(shù)雙核的新生肝細胞。小葉內(nèi)可見細胞浸潤，其中以淋巴細胞為主，發(fā)生碎片狀壞死病灶處細胞浸潤明顯。

三． 實驗結(jié)果

3.1 生化檢測

                                       圖：各組ALT、AST、ALP、TBIL和DBIL濃度

由上圖可見，與正常組比，ALT、AST、ALP、TBIL和DBIL 造模后表達明顯上升。其中ALT、AST和TBIL在24h小時后表達。ALP在1h 表達隨后開始下降，36h表達。圖計為實驗組與正常組使用T檢驗進行統(tǒng)計比較。*表示

P<0.05；**表示P<0.01。