分析性色譜的目的是定量或者定性測定混合物中各組分的性質(zhì)和含量。其它如鍵合相、氧化鋁、聚酰胺吸附劑也常用作快速色譜的固定相使用。定性的分析性色譜有薄層色譜、紙色譜等，定量的分析性色譜有氣相色譜、液相色譜等。色譜法應(yīng)用于分析領(lǐng)域使得分離和測定的過程合二為一，降低了混合物分析的難度縮短了分析的周期，是比較主流的分析方法。在中華人民共和國藥典中，有超過約600種化學(xué)合成藥和超過約400種中藥的質(zhì)量控制應(yīng)用了液相色譜的方法。

如果流路管中真漏氣了怎么辦？

建議是用外力使管路中充滿液體。

具體如下：

1、找到流路管進(jìn)入輸送泵的接頭。

2、擰下來。

3、用一干凈洗耳球的尖1端對準(zhǔn)管路的平整切口。

4、吸液體，看液面從流動相瓶里上升，至離洗耳球5cm左右時停止該動作。

5、快速把接頭擰回輸送泵上（這個過程可能會有少許流動相外泄，這是正?，F(xiàn)象）。

6、開機(jī)，開排液閥門，啟動輸送泵。

7、等排液管中流出的溶液沒有氣泡時，再關(guān)閉排液閥，儀器正常工作。

輸送泵和柱子：這些部分進(jìn)了氣泡一般不怕，沖掉就行。

液相色譜儀的常規(guī)操作及維修：　　1、過濾流動相，根據(jù)需要選擇不同的濾膜?！　?、對抽濾后的流動相進(jìn)行超聲脫氣10-20分鐘?！　?、打開HPLC工作站，連接好流動相管道，連接檢測系統(tǒng)。　　4、進(jìn)入HPLC控制界面主菜單，點(diǎn)擊manual，進(jìn)入手動菜單?！　?、有一段時間沒用，或者換了新的流動相，需要先沖洗泵和進(jìn)樣閥。沖洗泵，直接在泵的出水口，用針頭抽取。制備性色譜的目的是分離混合物，獲得一定數(shù)量的純凈組分，這包括對有機(jī)合成產(chǎn)物的純化、天然產(chǎn)物的分離純化以及去離子水的制備等。沖洗進(jìn)樣閥，需要在manual菜單下，先點(diǎn)擊purge，再點(diǎn)擊start，沖洗時速度不要超過10ml/min?！　?、調(diào)節(jié)流量，初次使用新的流動相，可以先試一下壓力，流速越大，壓力越大，一般不要超過2000。點(diǎn)擊injure，選用合適的流速，點(diǎn)擊on，走基線，觀察基線的情況?！　?、設(shè)計(jì)走樣方法。點(diǎn)擊file，選取se-lectusersandmethods，可以選有的各種走樣方法。若需建立一個新的方法，點(diǎn)擊newmethod。選取需要的配件，包括進(jìn)樣閥，泵，檢測器等，根據(jù)需要而不同。選完后，點(diǎn)擊protocol。一個完整的走樣方法需要包括：a、進(jìn)樣前的穩(wěn)流，一般2-5分鐘；b、基線歸零；c、進(jìn)樣閥的loading-inject轉(zhuǎn)換；d、走樣時間，隨不同的樣品而不同?！　?、進(jìn)樣和進(jìn)樣后操作。選定走樣方法，點(diǎn)擊start。進(jìn)樣，所有的樣品均需過濾。方法走完后，點(diǎn)擊trun，可記錄數(shù)據(jù)和做標(biāo)記等。全部樣品走完后，再用上面的方法走一段基線，洗掉剩余物。　　9、關(guān)機(jī)時，先關(guān)計(jì)算機(jī)，再關(guān)液相色譜。

隨著柱填料的快速發(fā)展，反相色譜法的應(yīng)用范圍逐漸擴(kuò)大，現(xiàn)已應(yīng)用于某些無機(jī)樣品或易解離樣品的分析。固定相的不同也可以導(dǎo)致選擇性發(fā)生變化，基柱、柱、C8柱、C18柱等的選擇性有很大差異，一般應(yīng)優(yōu)先考慮C8柱、C18柱，然后是基柱，再次是柱。為控制樣品在分析過程的解離，常用緩沖液控制流動相的pH值。但需要注意的是，C18和C8使用的pH值通常為2.5~7.5(2~8)，太高的pH值會使硅膠溶解，太低的pH值會使鍵合的脫落。有報(bào)告新商品柱可在pH 1.5~10范圍操作。

正相色譜法與反相色譜法比較表

正相色譜法 反相色譜法

固定相極性 高～中 中～低

流動相極性 低～中 中～高

組分洗脫次序 極性小先洗出 極性大先洗出