試劑準(zhǔn)備

1. 非乙?；痗AMP標(biāo)準(zhǔn)品

將5000 pmol/mL cAMP標(biāo)準(zhǔn)品溶液平衡至室溫。從#1至#6標(biāo)記六只潔凈試管。移取475μL 0.1M HCl到#1號(hào)試管，400μL到#2至#6號(hào)試管。加入25μL 5000 pmol/mL cAMP標(biāo)準(zhǔn)品到#1管中，劇烈渦旋震蕩。從#1管中取出100μL溶液至#2管中，渦旋震蕩。以此類推，重復(fù)上步操作，梯度稀釋至#6管。

經(jīng)以上操作，#1至#6管中cAMP標(biāo)準(zhǔn)品濃度分別為250,50，10,2,0.4和0.08 pmol/mL（詳見cAMP實(shí)驗(yàn)稀釋詳情鍵盤紙）。稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品需在30分鐘內(nèi)使用。

標(biāo)記一只試管作為無標(biāo)準(zhǔn)品空白對(duì)照（NSB）。移取600μL 0.1M HCl到NSB管中。

2. 洗滌液

將15 mL 10×洗滌液儲(chǔ)液加到135 mL去離子水中，稀釋成工作液。稀釋液可在室溫保存至試劑盒有效期限，或者3個(gè)月。

線性關(guān)系

cAMP濃度為16.0pmol/mL的樣品，用0.1M HCl進(jìn)行連續(xù)七次1:2梯度稀釋。將實(shí)際的cAMP濃度和測(cè)定的cAMP濃度繪制圖表。該直線的斜率為1.000，相關(guān)系數(shù)為0.999。

交叉反應(yīng)

部分相關(guān)化合物的交叉反應(yīng)由競(jìng)爭(zhēng)ELISA測(cè)定。將可能的交叉反應(yīng)物溶解到試劑盒分析緩沖液中，濃度從500pmol/mL至500,000pmol/mL。這些樣品通過乙?；赾AMP競(jìng)爭(zhēng)分析中被測(cè)定，通過比較樣品中交叉試劑的實(shí)際濃度，可以計(jì)算出交叉反應(yīng)，并用百分比(%)表示。

HBsAg試劑特點(diǎn)（檢測(cè)模式：臨床抗l體夾心法）：包被抗l體為山羊多抗。多抗具有高親和性和對(duì)抗原各種表位的反應(yīng)性。酶表抗l體為與HBsAg有不同結(jié)合位點(diǎn)的鼠復(fù)合單位，可測(cè)得HBsAg變異樣品，提高檢測(cè)的特異性（99.98%）提高檢測(cè)的靈敏度，應(yīng)用Parl Ehrich 學(xué)說（PEI）HBsAg標(biāo)準(zhǔn)品，對(duì)ad標(biāo)準(zhǔn)品的靈敏度為0.05ng/ml對(duì)ay標(biāo)準(zhǔn)品靈敏度為0.025ng/ml

武漢紐斯特生物科技有限公司（WuhanNewEastBiotechonologyCo.Ltd），系美國生命科學(xué)試劑供應(yīng)商美國NewEastBio在中國的子公司。公司位于武漢東湖高新技術(shù)開發(fā)區(qū)光谷生物城.美國NewEastBio專注于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域，主要產(chǎn)品有小分子、ELISA試劑盒、蛋白等，與世界高校和研究所、世界大制藥公司、生物科技公司和醫(yī)院等客戶建立了長期穩(wěn)定的合作關(guān)系，產(chǎn)品銷往全球。

樣品處理

紐斯特生物的ELISA試劑盒適用于檢測(cè)經(jīng)過鹽酸處理而終止內(nèi)源性磷酸二酯酶活性的cAMP樣品。這種樣品可直接應(yīng)用于檢測(cè)，而不需要蒸發(fā)和進(jìn)一步的處理。

組織樣本需預(yù)先冰凍于液氮中。在不銹鋼研缽中用液氮將組子樣本研磨成精細(xì)粉末。待液氮揮發(fā)完后，稱量冰凍組織樣本并加入10倍體積的0.1M HCl混勻。室溫以大于600g離心力離心，取上層清夜用0.1M HCl稀釋至適當(dāng)濃度。