Elisa試劑盒的操作注意事項(xiàng)

洗刷是ELISA試劑盒操作過(guò)程中決議實(shí)驗(yàn)勝敗的一個(gè)關(guān)鍵步驟。目的是除掉未結(jié)合的反響物，四環(huán)素ELISA試劑盒廠家，間斷抗原抗體反響，除掉標(biāo)本中與反響無(wú)關(guān)的成分、游離的酶標(biāo)物以及反響過(guò)程中吸附于固相載體上的非特異性物質(zhì)。

斷定效果須運(yùn)用Elisa試劑盒測(cè)讀儀，比色法判讀可選擇單波長(zhǎng)或雙波長(zhǎng)，根據(jù)反響液顏色的不同選用不同波長(zhǎng)的濾光片，以空白孔校零測(cè)定反響孔的吸光度值。具有杰出的重復(fù)性。

ELISA試劑盒的操作方法——雙夾心法

1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg/ml。在每個(gè)聚乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃ 過(guò)夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，四環(huán)素ELISA試劑盒價(jià)格，每次3分鐘。（簡(jiǎn)稱(chēng)洗滌，下同）。

2.　加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，四環(huán)素ELISA試劑盒多少錢(qián)，置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌。（同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔）。

3.　加酶標(biāo)：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。

4.　加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。

5.　終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。

6.　結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽(yáng)性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“ ”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽(yáng)性。

Elisa試劑盒操作步驟

1、固相載體的挑選：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其方式可所以凹孔平板、試管、珠粒等。

2、包被或抗原的挑選：將或抗原吸附在固相載體表面時(shí)，陜西四環(huán)素ELISA試劑盒，要求純度要好，吸附時(shí)一般要求PH在9.0～9.6之間。

3、 酶標(biāo)記作業(yè)濃度的挑選：首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定。然后再固定其它條件或采取“方陣法"，在正式試驗(yàn)體系里準(zhǔn)確地滴定其作業(yè)濃度。

4、酶的底物及供氫體的挑選：對(duì)供氫體的挑選要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無(wú)色。

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