親和層析的產(chǎn)生背景

殘留檢測(cè)的確證方法主要是儀器分析法，如LC-MS、GC-MS或HPLC，這些方法中因殘留組分量很小，檢測(cè)方法需要較高靈敏度和準(zhǔn)確性。樣品前處理是檢測(cè)技術(shù)的，傳統(tǒng)的樣品凈化技術(shù)主要有液—液分配(LLE)、固相萃取(SPE)、基質(zhì)固相分散(MSPD)、超臨界萃取(SFE)等。但是這些凈化技術(shù)通常需要多個(gè)凈化步驟，T2毒素親和柱廠家，缺乏選擇性，不但費(fèi)時(shí)繁瑣、容易污染、損失樣本且會(huì)引起嚴(yán)重的本底干擾，降低結(jié)果的可靠性。因此建立有效的樣本凈化技術(shù)已成為痕量分析的主要問題。近20年，T2毒素親和柱價(jià)格，固相提取領(lǐng)域研究的不斷深入，推進(jìn)了從分析物中選擇性萃取目標(biāo)產(chǎn)物為目的的新技術(shù)發(fā)展(Hennion等，2003)。

親和柱——親和層析的原理

通常，在開始親和層析前需要預(yù)先進(jìn)行全細(xì)胞提取物的粗制，例如細(xì)胞裂解液，生長(zhǎng)培養(yǎng)基。

首先將固定相裝入帶有流動(dòng)相的色譜柱中，貴州T2毒素親和柱，其中含有某類特定的生物大分子（從DNA到蛋白質(zhì)，取決于實(shí)驗(yàn)需求）。等待一段時(shí)間使兩相充分混合，隨后將洗滌緩沖液倒入色譜柱中。洗滌緩沖液通過破壞非目標(biāo)生物分子與固定相的較弱結(jié)合來去除非目標(biāo)生物分子。目標(biāo)生物分子對(duì)固定相具有較高的親和力，因此能夠保持與固定相的結(jié)合，而不會(huì)被洗滌緩沖液沖走。然后將洗脫緩沖液倒入含有剩余目標(biāo)生物分子的色譜柱中。洗脫緩沖液比洗滌緩沖液，能夠從更大程度上減弱靶生物分子與固定相之間的相互作用，T2毒素親和柱公司，從而洗脫靶生物分子。洗脫得到的溶液包含洗脫緩沖液和目標(biāo)分子，稱為洗脫液。

固定相一般是凝膠基質(zhì)，常見的有瓊脂糖。為了防止目標(biāo)分子與配體結(jié)合過程中的空間干擾或重疊，首先將含有烴鏈的抑制連接到瓊脂糖珠（固體支持物）上。這種具有烴鏈的抑制通常被稱為瓊脂糖珠和靶分子之間的間隔基。

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