為了證明這種方法在合成化學(xué)中的潛在應(yīng)用，CAS：626-43-7哪家好，選擇( )-estrone作為目標(biāo)進(jìn)行合成放大。按照Corey以及List報(bào)道的路線，合成得到Torgov報(bào)道的，-二酮后，在優(yōu)化條件下對其進(jìn)行催化氫化定量得到羥基酮（ee ，?dr :），然后經(jīng)Prins環(huán)化脫水和IBX氧化得到二烯u，再通過兩步轉(zhuǎn)化得到( )-estrone。（圖片來源：Chem. Sci.）對反應(yīng)中只有一個(gè)羰基被還原的現(xiàn)象產(chǎn)生好奇。當(dāng)用劇烈的條件時(shí)，也難以得到二醇（Scheme ，eq. ）。

通過親和色譜純化所有候選物，并使用前面描述的分光光度測定法確定它們對的比活性（Chart ）。雖然型TKgst對沒有表現(xiàn)出活性，但與HLHS 相比，包含LI的所有突變體都具有更高的活性，表明該突變對的C-C鍵切割提供了協(xié)同效應(yīng)。結(jié)果（Chart ）表明，用非極性殘基如Gly (HLHGLI)代替His 顯著提高了活性。Gly和其他兩個(gè)脂肪族殘基提供的疏水環(huán)境有利于穩(wěn)定的非極性頭部（）（圖）。

這種廉價(jià)、非揮發(fā)性和高反應(yīng)性的共底物是通過反應(yīng)混合物的原位蒸餾進(jìn)一步分離脂肪醛"或 "的的候選物。反應(yīng)在°C和pH .下使用純化的WT和早先鑒定的突變體進(jìn)行（表），通過 H NMR進(jìn)行定期監(jiān)測。通過跟蹤和的消失和伴隨產(chǎn)物和的出現(xiàn)，以證明的羥基乙?；?的?；谝掖既┥系霓D(zhuǎn)移（表）。 TKgst突變體FI較早在分析規(guī)模上被確定為候選者。


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