1、 :操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、 血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、 細(xì)胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。
進(jìn)口分裝:檢測范圍和靈敏度不同,用量少時(shí),可使用分裝,銨態(tài)氮測試盒供應(yīng),前期是它的長久性不是很好。試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線點(diǎn)OD 值均在2.0±0.2,零孔的OD 值都控制在0.10以下。試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)R≥0.98。試劑盒重復(fù)性好,銨態(tài)氮測試盒廠商,板內(nèi)、板間變異系數(shù)均<9 %。試劑的組份都多給20%的富余量,銨態(tài)氮測試盒,確保完成48/96孔的檢測,避免分次檢測可能造成試劑量不足的情況。

使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。8. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。9. 洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。10. 底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。11. 加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。12. 按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
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