脂質(zhì)體法

　　是用帶正電荷的脂質(zhì)體作載體攜帶外源基因，與帶負(fù)電荷的細(xì)胞膜融合，把外源基因?qū)爰?xì)胞。用脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)化原生質(zhì)體，其毒性較電1擊法和PEG法小，且適于運(yùn)輸大分子DNA穿過(guò)質(zhì)膜。

　　Antonelli等（1990）用該法將基因組DNA轉(zhuǎn)入BMS玉米原生質(zhì)體，獲得轉(zhuǎn)化了的再生愈傷組織，轉(zhuǎn)化率高達(dá)8%。

　　脂質(zhì)體法的優(yōu)點(diǎn)是轉(zhuǎn)化受體為單個(gè)細(xì)胞，易于篩選，不易形成嵌合體，對(duì)于原生質(zhì)體再生能力好的植物品種，是非常好的轉(zhuǎn)化方法。

PEG法

　　其基本原理是在二價(jià)陽(yáng)離子（Mg2 、Ca2 等）存在的情況下，PEG能夠有效地誘導(dǎo)DNA產(chǎn)生顆粒狀沉淀，從而使細(xì)胞膜能夠通過(guò)內(nèi)吞噬作用吸收這種DNA顆粒。

　　1993年Golovkin等用PEG法將H89的原生質(zhì)體與含有鼠二氫葉酸還原酶（DHFR）突變基因（氨甲1喋呤抗性）的質(zhì)粒共培養(yǎng)，此基因插入了玉米Ds1轉(zhuǎn)座子中。篩選得到的愈傷組織，在不含激1素的培養(yǎng)基上再生長(zhǎng)出植株。同年Omirulleh等用PEG法將外源基因?qū)氲搅薍E89的原生質(zhì)體中，建立了植株再生的轉(zhuǎn)化體系。

　　PEG法雖然轉(zhuǎn)化效率較高，但必須以裸1露的原生質(zhì)體為受體，而且還受到基因型的限制。

20世紀(jì)40年代以前，對(duì)于基因的化學(xué)本質(zhì)并不了解。直到1944年O.T.埃弗里等證實(shí)雙球菌的轉(zhuǎn)化因子是DNA，才用實(shí)驗(yàn)證明了基因是有遺傳效應(yīng)的DNA段。

1955年S.本澤用大腸T4噬菌體作材料，研究快速溶菌突變型rⅡ的基因精細(xì)結(jié)構(gòu)，發(fā)現(xiàn)在一個(gè)基因內(nèi)部的許多位點(diǎn)上可以發(fā)生突變，并且可以在這些位點(diǎn)之間發(fā)生交換，從而說(shuō)明一個(gè)基因是一個(gè)功能單位，但并不是一個(gè)突變單位和交換單位，因?yàn)橐粋€(gè)基因可以包括許多突變單位（突變子）和許多重組單位（重組子）（見(jiàn)互補(bǔ)作用）。

1969年J.夏皮羅等從大腸中分離到乳糖操縱子，并且使它在離體條件下進(jìn)行轉(zhuǎn)錄，證實(shí)了一個(gè)基因可以離開(kāi)染色體而獨(dú)立地發(fā)揮作用，腺病毒濃縮，于是顆粒性的遺傳概念更加確立。隨著重組DNA技術(shù)和核酸的順序分析技術(shù)的發(fā)展，對(duì)基因的認(rèn)識(shí)又有了新的發(fā)展，主要是發(fā)現(xiàn)了重疊的基因、斷裂的基因和可以移動(dòng)位置的基因。

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