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細胞凍存袋操作需要注意?
1.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15m培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。
2.復蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結為復蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,200-074-401凍存袋哪家好,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。
3.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題是DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,200-074-400凍存袋哪家好,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響 細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候對一般細胞沒有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是 10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
動物細胞凍存組織
1. 首先準備好用于包裝樣本的鋁箔或冷凍保存管,并且用油性記號筆在鋁箔或凍存管外表多處寫明樣本編號。
2. 準確切除所需組織后,立即剔除結締組織和脂肪組織等非研究所需的組織類型。
3. 在RNase-free 的生理鹽水中迅速漂洗樣本,凍存袋哪家好,以去除血漬和污物。
4. 用準備好的鋁箔或冷凍保存管裝載包裹組織,迅速投入液氮冷卻。
5. 填寫樣本登記單,寫明樣本名稱、組織類型、編號、取樣日期、樣本處理過程等情況。
為什么需要凍存袋?
細胞培養(yǎng)的傳代及日常維持過程中,CS50凍存袋哪家好,在培養(yǎng)器具、培養(yǎng)液及各種準備工作方面都需大量的耗費,而且細胞一旦離開活物開始原代培養(yǎng),它的各種生物特性都將逐漸發(fā)生變化并隨著傳代次數(shù)的增加和體外環(huán)境條件的變化而不斷有新的變化。因此及時進行細胞凍存十分必要。細胞冷凍儲存在-70℃冰箱中可以保存一年之久;細胞儲存在液氮中,溫度達-196℃,理論上儲存時間是沒有限制的。
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