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凍存袋的原理
細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融,實驗證明這樣可以較大限度的保存細胞活力。如今細胞凍存多采用甘油或DMSO作保護劑,這兩種物質(zhì)能提高細胞膜對水的通透性,加上緩慢冷凍可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,減少細胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細胞損傷。復蘇細胞應采用快速融化的方法,這樣可以保證細胞外結(jié)晶在很短的時間內(nèi)即融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對細胞造成損傷。
使用凍存袋的方法
復蘇細胞應采用快速融化的方法,這樣可以保證細胞外結(jié)晶在很短的時間內(nèi)即融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對細胞造成損傷。從增殖期到形成致密的單層細胞以前的培養(yǎng)細胞都可以用于凍存,但好為對數(shù)生長期細胞。在凍存前一天好換一次培養(yǎng)液;將凍存管放入液氮容器或從中取出時,要做好防護工作,以免;
細胞凍存步驟
(1)將標本編號,并用Marker筆仔細標注于凍存管管蓋及管壁上,200-074-400凍存袋多少錢,同時將每管編號、內(nèi)容物、取材日期記錄于登記本上。
(2)將凍存管裝入凍存袋,200-074-401凍存袋多少錢,戴上棉線手套和防護面罩,迅速放入液氮罐中30~60秒速凍,至凍存組織完全凍住,凍存袋多少錢,取出待液氮完全揮發(fā)(注意動作輕柔,避免液氮濺灑)。
(3)將經(jīng)液氮速凍后的組織放入-80℃冰箱相應編號盒中,長期保存。
(4)取材完畢后,將剩余新鮮標本浸泡于10%中爾馬林液中固定(切記不要拿錯病理號),做好和當日冰凍值班醫(yī)生的交接,CS50凍存袋多少錢,避免遺漏。
(5)清洗取材臺及取材器具,器具需用消毒液完全浸泡10~15min,清水沖洗后擦干置于干燥處保存?zhèn)溆?,取材器具應定期高溫消毒?/p>
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