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細(xì)胞凍存步驟
1.用移液器吸走原培養(yǎng)基,加入適量PBS洗1-2遍;
2.加入適量胰酶,置于培養(yǎng)箱中消化;
3.待消化到位后加入適量血漿或完全培養(yǎng)基終止消化,800-1000rpm離心3-5min;
4.配制凍存液,待細(xì)胞離心后去上清,加入凍存液重懸,調(diào)整細(xì)胞濃度為3×106~1×107 cells/mL,轉(zhuǎn)移到凍存管中;
5.將凍存管放入程序降溫盒中,-80度過(guò)夜,然后轉(zhuǎn)移到液氮中保存。
6.凍存細(xì)胞后應(yīng)取出一管復(fù)蘇,檢測(cè)細(xì)胞的存活率。理論上細(xì)胞可在液氮內(nèi)長(zhǎng)期保存,CS250凍存袋報(bào)價(jià),
為穩(wěn)妥起見可在細(xì)胞凍存半年后復(fù)蘇培養(yǎng),觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,再繼續(xù)凍存
凍存袋介紹
細(xì)胞凍存是將細(xì)胞放在低溫環(huán)境,減少細(xì)胞代謝,以便長(zhǎng)期儲(chǔ)存的一種技術(shù)。細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一,起到了細(xì)胞保種的作用。連續(xù)培養(yǎng)的細(xì)胞系容易發(fā)生遺傳漂變,有限細(xì)胞系終會(huì)發(fā)生衰老,CS250凍存袋價(jià)格,所有培養(yǎng)的細(xì)胞都易受到微生物污染。已建立的細(xì)胞系是一種寶貴資源,CS250凍存袋批發(fā),更換細(xì)胞系成本高昂,而且耗費(fèi)時(shí)間。可以利用細(xì)胞凍存的形式來(lái)購(gòu)買、寄贈(zèng)、交換和運(yùn)送某些細(xì)胞。
細(xì)胞凍存的研究
細(xì)胞培養(yǎng)和保種技術(shù)廣泛用于生命科學(xué)研究的各個(gè)領(lǐng)域,如研制、人工和再生醫(yī)學(xué)等。冷凍保存是目前細(xì)胞長(zhǎng)期保存的通用方法,有利于降低細(xì)胞被微生物污染和細(xì)胞之間交叉污染的風(fēng)險(xiǎn),CS250凍存袋,并且能夠減少細(xì)胞因傳代培養(yǎng)而引起的遺傳變異和形態(tài)改變,避免有限細(xì)胞系出現(xiàn)衰老或轉(zhuǎn)化。然而,細(xì)胞的凍存和復(fù)蘇過(guò)程會(huì)對(duì)細(xì)胞造成較大損傷,降低細(xì)胞膜中的脂質(zhì)含量,產(chǎn)生過(guò)氧化,同時(shí)影響細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和代謝途徑[1-3]。
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